文档介绍：荧光法测定乙酰水杨酸和水杨酸实验化学3-2(仪器分析实验)*1、实验目的(1)掌握荧光法测定药物中乙酰水杨酸的方法(2)了解CaryEclipse型荧光光谱仪的基本操作(3)强化称量、移液、配溶液等基本操作Date实验原理电子处于激发态是不稳定状态,返回基态时,通过辐射跃迁(发光)和无辐射跃迁等方式失去能量;传递途径辐射跃迁荧光延迟荧光磷光内转移外转移系间跨越振动弛预无辐射跃迁激发态停留时间短、返回速度快的途径,发生的几率大,发光强度相对大;荧光:10-7~10-9s,第一激发单重态的最低振动能级→基态;磷光:10-3~10s;第一激发三重态的最低振动能级→基态;DateS2S1S0T1吸收发射荧光发射磷光系间跨越内转换振动弛豫能量l2l1l3外转换l2T2内转换振动弛豫Date辐射能量传递过程荧光发射:电子由第一激发单重态的最低振动能级→基态(多为S1→S0跃迁),发射波长为‘2的荧光;10-7~10-9s。由图可见,发射荧光的能量比分子吸收的能量小,波长长;‘2>2>1;磷光发射:电子由第一激发三重态的最低振动能级→基态(T1→S0跃迁);电子由S0进入T1的可能过程:(S0→T1禁阻跃迁)S0→激发→振动弛豫→内转移→系间跨越→振动弛豫→T1发光速度很慢:10-3~10s。光照停止后,可持续一段时间。Date溶液浓度与荧光强度的关系有线性关系:荧光强度If正比于吸收的光量Ia和荧光量子效率:If=Ia由朗-比耳定律:Ia=I0(1-10-lc)If=I0(1-10-lc)=I0(1-e-lc)浓度很低时,将括号项近似处理后:If=I0lc=KcDate分子产生荧光必须具备的条件1)具有合适的结构;2)具有一定的荧光量子产率。荧光量子产率():荧光量子产率与激发态能量释放各过程的速率常数有关,如外转换过程速度快,不出现荧光发射;Date仪器结构流程测量荧光的仪器主要由四个部分组成:激发光源、样品池、双单色器系统、检测器。特殊点:有两个单色器,光源与检测器通常成直角。基本流程如图:单色器:选择激发光波长的第一单色器和选择发射光(测量)波长的第二单色器;光源:灯和高压***灯,染料激光器(可见与紫外区)检测器:光电倍增管。Date荧光分析方法特点1)灵敏度高比紫外-可见分光光度法高2~4个数量级;为什么?检测下限:~g/cm-3相对灵敏度:。2)选择性强既可依据特征发射光谱,又可根据特征吸收光谱;3)试样量少缺点:应用范围小。Date仪器与试剂仪器:CaryEclipse荧光光谱仪,石英比色皿,容量瓶,移液管,玻璃注射器,漏斗,量筒,滤纸。试剂:乙酰水杨酸,水杨酸,乙醇,阿司匹林药片。Date