丙型肝炎病毒核心抗原检测技术国内外临床研究应用情况.doc

文档介绍：丙型肝炎病毒核心抗原检测技术国内外临床研究应用情况
(综述)
张贺秋

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)感染引起的一种重要的世界性传染病。一般地,15~20%左右的HCV感染者为自限性感染,可以很快的康复。但是,也有80~85%的感染者发展为慢性丙型肝炎,其中又有20%的可发展为肝纤维化,最终有4~5%的肝纤维化患者发生肝细胞性肝癌,危害十分严重。
目前,慢性丙型肝炎除了干扰素有确切的疗效外,尚无其它有效的治疗药物。国际上近来报道,PEG修饰的干扰素加利巴韦林联合治疗可在40~50%左右的患者获得较好的反应,但也有疗程长、价格昂贵、毒副作用大以及易反弹等缺点。此外,丙型肝炎疫苗的研制也因HCV高度变异而困难重重,短期内难有突破性进展。因此,尽早检出HCV感染者,阻断HCV的传播是当务之急。
1 HCV检测技术的现状
HCV一般通过被HCV污染的血液和血液制品传播,现在常用的HCV检测技术有两种方式:(1)间接检测,主要检测抗HCV抗体;(2)直接检测,通过定性或定量检测HCV病毒粒子的组成成分确定病毒的存在,例如HCV RNA。这两种检测方式在确诊HCV感染,选择HCV感染者的治疗方案以及评价抗HCV治疗的疗效方面起到了关键作用。
抗HCV抗体的检测
上世纪九十年代初,利用重组HCV抗原开发出了抗HCV抗体检测技术,即酶免疫分析(enzyme immunoassays, EIAs)技术,已经发展到第三代。该技术可检测样本中针对不同HCV抗原(如C区、NS3区、NS4区和NS5区等)的混合抗体,目前检测的特异性已高达99%以上。
由于缺乏更敏感的金标准,抗HCV EIA技术的敏感性还很难确定。在免疫健全的患者中,抗HCV EIA的检测敏感性高于99%,几乎所有的HCV感染者都可以被检测出来。但对于正进行血液透析的患者和严重免疫缺损患者,虽然其体内有HCV复制活跃,但EIA检测可能就是阴性结果。为此,某些厂商又开发了免疫条带分析作为确证实验,如Ortho公司开发的RIBA等。因第三代EIA在临床检测中表现良好,目前免疫条带分析在临床的实际应用的意义已不是很大。但因为在血站EIA检测结果阳性的阳性预测值(positive predictive value, PPV)相对较低,其在血站仍然有很大的用武之地。
HCV RNA的检测
定性检测HCV RNA 定性检测中HCV RNA的存在被视为HCV病毒复制的标志。因其敏感性比现有的任何一种定量检测方法都要高,定性检测HCV RNA是非常有用的一种直接检测HCV是否存在的技术。该技术基于利用RT-PCR技术或转录介导的扩增(transcription-mediated amplification, TMA)技术特异性扩增HCV基因组RNA序列,又称为核酸扩增(nucleic acid amplification techniques, NAT)技术。目前市面上的HCV RNA定性检测试剂的检测临界值为50 HCV RNA IU/mL和10 IU/mL,主要产品有Roche公司的Cobas Amplicorä or Amplicorò HCV Test, Version ;Chiron公司基于TMA技术的Procle