文档介绍：第七章
生产菌种的扩大培养与保藏
1
1
定义
•种子扩大培养:是指将保存在砂土管、
冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种
接入试管斜面活化后,在经过扁瓶或摇
瓶及种子罐逐级放大培养而获得一定数
量和质量的纯种过程。这些纯种培养物
称为种子。
2
2
作为种子的准则
•菌种细胞的生长活力强,移种至发酵罐
后能迅速生长,迟缓期短;
•生理形状稳定;
•菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的
要求;
•无杂菌污染;
•保持稳定的生产能力。
3
3
本章讲述的内容
•第一节种子的制备过程
•第二节种子质量的控制
•第三节实例
•第四节生产发酵罐的无菌接种
•第五节菌种的保藏与复壮
4
4
第一节种子的制备过程
•种子制备的过程大致可分为:
–实验室种子制备阶段
–生产车间种子制备阶段
5
5
一、实验室种子的制备
•实验室种子的制备一般采用两种方式
–对于产孢子能力强的及孢子发芽、生长繁
殖快的菌种可以采用固体培养基培养孢子
,孢子可直接作为种子罐的种子,这样操
作简便,不易污染杂菌。
–对于产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种
,可以用液体培养法。
6
6
(一)孢子的制备
1,细菌孢子的制备
9细菌的斜面培养基多采用碳源限量而氮
源丰富的配方。
9培养温度一般为37˚C。
9细菌菌体培养时间一般为1~2天,产芽
孢的细菌培养则需要5~10天。
7
7
2,霉菌孢子的制备
9霉菌孢子的培养一般以大米、小米、玉
米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基
。
9培养的温度一般为25~28˚C。
9培养时间一般为4~14天。
8
8
3,放线菌孢子的制备
9放线菌的孢子培养一般采用琼脂斜面培
养基,培养基中含有一些适合产孢子的
营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨
和一些无机盐等。
9培养温度一般为28˚C。
9培养时间为5~14天。
9
9
(二)液体种子制备
1,好氧培养:
对于产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌
种,如产链霉素的灰色链霉菌(S.
griseus)、产卡那霉素的卡那链霉菌(S.
Kanamuceticus)可以用摇瓶液体培养法
。将孢子接入含液体培养基的摇瓶中,
于摇瓶机上恒温振荡培养,获得菌丝体
,作为种子。
试管→三角瓶→摇床→种子罐
10
10