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黑木耳多糖对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用
钱根才闵丽珊
。浙江省长兴县人民医院·长兴浙江省湖州师范学院附属湖州市中心医院·湖州
摘要目的:探讨黑木耳多糖,从后处理对新生大鼠缺氧缺血性脑
损伤的影响。方法:新生日龄大鼠只随机分为空白对照组,模型组,低、中、高剂量治
疗组。缺氧缺血脑损伤后即刻腹腔注射从或生理盐水,观察对缺氧缺血小时后脑组织中超氧
化物岐化酶、丙二醛和一氧化氮含量、小时后脑组织含水量、神经元凋亡的影响。结
果:模型组新生大鼠活性下降,、含量升高,不同剂量从后处理均能使活性升高,
、含量下降,并呈剂量依赖性。中、高剂量治疗组新生大鼠较模型组脑含水量及神经元凋亡
数目明显减少.,.。结论:缺氧缺血后干预对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤有保护作
用,其作用机制可能与减少氧化应激,降低含量有关。
主题词脑损伤/中医药疗法黑木耳多糖/治疗应用大鼠动物,新生
新生儿缺氧缺血性脑病—, 组,模型组,低剂量· 治疗组
是围产期各种因素引起的缺氧和缺血所致的颅脑损、中剂量/.· 治疗组、高剂量
伤,是新生儿死亡和婴幼儿神经系统功能障碍的主要原因。·治疗组,其中只动物于缺血
因其病因复杂,难以实行有效的预防。在的发病后小时断头取脑,测脑组织、、等各项生化指
机制中,自由基的细胞毒性起着重要的作用。早期脑缺血再标;另只分别于检测后小时断头取脑,测脑含水量和
灌注可以通过钙离子内流、黄嘌呤氧化酶的活化等途径导致神经元凋亡。模型制作:新生鼠法【制作模
细胞毒性自由基的形成,进而通过使膜脂质过氧化、细胞蛋型。术前称重及编号,乙醚吸人麻醉,%酒精消毒皮肤,仰
白质和核苷酸氧化而损伤细胞。卧位,行颈部正中切口,长约—.,依次分离皮肤、皮下
黑木耳多糖/ ,是层脂肪及肌肉,
菌纲真菌黑木耳的主要活性成分,目前已发现有降血糖、降扎,缝合伤口并再次消毒皮肤,整个手术过程在分钟内完
血脂、抗辐射及降低凝血酶活性的功效,并能够清除活性成。术后放回原饲养环境中恢复小时后,将大鼠置于自制
氧和保护线粒体功能】。有研究显示黑木耳多糖能显著延常压低氧舱,按一定比例输人氧气和氮气,测氧仪监测氧浓
长昆明小鼠耐缺氧的时间,但黑木耳多糖对新生动物缺氧度在%% ~%,舱内温度控制在±℃,湿度为
缺血性脑损伤的作用却未见报道。本实验在建立新±%,缺氧时间持续小时。实验结束后将大鼠放回鼠笼
生大鼠模型的基础上,检测治疗后脑组织超氧化由母鼠喂养。假手术组只分离左侧颈总动脉,缝合皮肤,不
物歧化酶,活性、氧化应激产物一氧缺血缺氧。不同剂量治疗组于缺血缺氧分钟后腹腔
化氮,和丙二醛,含量及注射分别为、、/·。假手术组和模型
神经元凋亡,以探讨治疗新生大鼠的作用机制。组腹腔注射等量的生理盐水。
材料和方法. 观察指标及测定
. 实验材料常压缺氧舱:自制××塑料.. 脑组织、、检测新生大鼠缺氧缺血
容器,两端各有一直径为小孔,分别为进气孔和出气孔, 小时后行乙醚吸人麻醉,迅速断头处死,取左侧大脑半球皮
容器底层铺有碱石灰以吸收二氧化碳及水分;一型便质,按:的比例加入冷生理盐水作匀浆介质,在
携式数字测氧仪:浙江省建德市利达仪器厂生产,测氧范围冰水浴中研磨分钟,再将匀浆液以/离心分钟,
% 一%;光学显微镜:日本。黑木耳多糖砌￡一取上清液,即制成%脑组织匀浆。活性采用黄嘌呤氧
纰如妇,:购自上海康舟真菌多糖化酶法测定,采用改良的硫代巴比妥酸法测定,用
有限公司。、、检测试剂盒、考马斯亮蓝蛋白定量硝酸还原酶法测定,匀浆蛋白含量用考马斯亮兰法测定。实
试剂盒、试剂盒:购于南京建成生物技术公司;其余试验严格按照试剂盒说明书操作。
剂均为市售分析纯。新生日龄大鼠,体重.. .. 脑含水量检测新生大鼠缺氧缺血小时后行乙
,由浙江省医学科学院实验动物中心提供。醚吸人麻醉,迅速断头取脑,取每侧大脑半球后半部分
. 动物分组、模型制备及给药~ ,称重。其中左半球颈总动脉结扎侧后部代表损
只日龄大鼠,随机分组,每组只。假手术伤最严重的区域,右半球对应区域作为对照,然后将标本放
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人℃烘箱中干燥铝小时后取出再称重,计算脑半球的含和含量增高,进一步证实了氧自由基和在新生
水量。脑半球含水量占湿重的百分比公式为:含水量大鼠中的重要作用。等于年首次在新生大
%湿重一干重/湿重%。鼠脑缺氧缺血模型上,用电泳和原位标记方法
.. 神经元凋亡检测新生大鼠缺氧缺血小时后行法检测到脑细胞凋亡,之后相继有大量的实验证明了凋亡
乙醚吸人麻醉,迅速断头取脑,制作脑组织石蜡切片。用是缺