文档介绍：分类号: 单位代码: 10364
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安徽农业大学
硕士学位论文
牡荆化学成分及其抑菌活性研究
Constituents and Antibacterial Activities of Vitex negundo Linn.
研究生: 凌玮玮
指导教师: 张正竹教授
合作指导教师: 凌铁军副教授
申请学位门类级别: 医学硕士
专业名称: 营养与食品卫生学
研究方向: 食品安全检测与控制
所在学院: 茶与食品科技学院
答辩委员会主席:
二0 一0年六月
独创性声明
本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。
研究生签名: 时间: 2010 年 6 月 10 日
关于论文使用授权的说明
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研究生签名: 时间: 2010年 6 月10日
第一导师签名: 时间: 2010年6 月 10日
摘要
牡荆(Vitex negundo Linn. var. cannabifolia)为马鞭草科牡荆属(Vitex L.)植物,在我国有广泛分布,其茎叶、根部和果实皆可入药。国内外学者对牡荆属植物穗花牡荆(Vitex agnus-castus L.)、黄荆(Vitex negundo L.)、蔓荆(Vitex trifolia L.)等的化学成分及相关生物活性做了大量的研究,发现牡荆属植物含有大量的黄酮类、二萜类、植物甾体激素类、环烯醚萜类、苯丙素类化合物,以及多种挥发性化学成分,其生物活性主要涉及调节激素水平、抗肿瘤、消炎镇痛、抗菌、抗氧化等。本文以采集于安徽宣城地区牡荆的干燥地上部分为材料,对其抑制腐败菌的化学成分进行研究。研究结果对系统了解牡荆化学成分,利用牡荆资源开发新型天然防腐剂具有重要意义。
本课题通过比较牡荆地上部分95%乙醇粗提物的石油醚萃取部分、氯仿萃取部分、正丁醇萃取部分的抑菌活性,确定牡荆抑菌活性成分的集中部分。利用GC-MS对牡荆挥发油化学成分进行分析,确定其主成分。利用多种色谱分离方法(硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、MCI-gel CHP20P柱色谱)对活性化学成分集中的萃取物进行分离纯化。应用光谱学方法(EI-MS、ESI-MS、NMR、UV)对分离所得的单体化合物物进行结构鉴定。采用打孔法、微量稀释法检测分离纯化所得的单体化合物、挥发油及挥发油主成分对大肠杆菌、枯草杆菌、四联球菌和荧光假单胞杆菌的抑制作用,筛选主要抑菌活性成分。
结果表明牡荆挥发油的主要成分为石竹烯(%)、β-榄香烯(%)和桧烯(%);从牡荆提取物石油醚萃取部分、正丁醇萃取部分分离得到8个化合物,应用光谱学方法(EI-MS、ESI-MS、NMR、UV)共鉴定出5个单体化合物, 分别为γ-生育酚(化合物1)、生育醌(化合物2)、豆甾-5-烯-3-醇(化合物3)、5, 3', 4'-三羟基-3, 6, 7-三甲氧基黄酮(化合物6)、异牡荆素(化合物8);采用GC-MS对化合物4和5进行了初步鉴定,分别为α-亚麻酸甲酯(化合物4)和三甾体混合物(化合物5),三甾体混合物主成分为麦角甾-5-烯-3-醇、豆甾-5, 22-二烯-3-醇、豆甾-5-烯-3-醇。其中化合物1、2、3、4为首次从该属植物中分离得到。
抑菌活性测定结果显示,牡荆粗提物对枯草杆菌、大肠杆菌、四联球菌、荧光假单胞菌都有一定的抑制作用,其主要抑菌活性部位为石油醚部分和正丁醇部分,抑菌活性与添加提取物浓度呈正相关关系。进一步研究牡荆粗提物的石油醚和正丁醇部分活性成分的抑菌活性发现,牡荆挥发油、石竹烯和β-榄香烯均对大肠杆菌、枯草杆菌、四联球菌表现出较强的抑制作用,而分离所得的单体化合物在浓度为1000µg/mL以下时只有5, 3', 4'-三羟基-3, 6, 7-三甲氧基黄酮(化合物6)对供试菌有一定抑制作用。说明挥发油是牡荆的主要抑菌活性成分,其中的含量较高的
石竹烯、β-榄香烯对其抑菌活性有较大贡献,5, 3', 4'-三羟基-3, 6, 7-三甲氧基黄酮(化合物6)也具