文档介绍：青岛科技大学
硕士学位论文
离子液体和聚苯胺纳米管修饰丝网印刷DNA生物传感器的应用研
究
姓名:冷翠翠
申请学位级别:硕士
专业:应用化学
指导教师:张宜恒
20100603
离子液体和聚苯胺纳米管修饰丝网印刷生物传感器的应用研究摘要本研究构建了掺杂导电油墨制作的丝网印刷电极,并将其用于对特定片段和肿瘤细胞进行识别和测定,为许多疾病的临床早期诊断提供基础性研究。本文着重进行了三种类型的ǜ衅鞯难兄坪托灾恃芯浚客∷⒌缂ǖ墓菇ā:铣闪诵蚊病⒊叽绾偷绲悸适实钡木郾桨纺擅坠埽然后将室温离子液体与所合成的聚苯胺纳米管共同掺杂入导电油墨中,用于制造三电极丝网印刷ǜ衅髦械墓ぷ鞯缂ǎ儆每蔷厶悄ぜ右愿哺切奘蜦乜极。优化了掺杂和修饰条件,在最佳条件下所得的电极具有较低的表面附抗和较高的电化学灵敏度。谡飧龃ǜ衅鹘⒘艘恢只诿阜糯蟮腄央心检测的方法。将修饰的辣根过氧化物酶瓾潭ǖ皆咏缓玫腄上,通过呋底物邻氨基酚和双氧水反应产生信号。在实验选定的最佳条件下,。其中,三碱蟮错配序列显示有微弱的电化学信号而完全非互补序列则无信号检出。这说明我们设计的感器具有良好的选择性。谝陨瞎ぷ鞯幕∩希颐歉慕耸笛榉椒ǎ芯苛肆硪恢至槊舳雀的基于六氨基钌和金纳米粒子放大信号的电化学方法法检测囟ㄐ蛄械纳物传感器。首先,将巯基修饰的捕获潭ㄔ谀擅捉鹦奘蔚乃客∷⒌缂ū面,之后分别与目标捅昙墙鹉擅琢W拥·位毓基修饰的检测探针、探针杂交,形成了“夹心降腄杂交复合物。通过六氨基钉特异性吸附到纳米金结合的单链校被煞⑸趸乖从Σ藕磐ü剖钡缌糠ḿ觳信号进一步增强了检测的灵敏度。结合以上两种因素,该ǜ衅骺杉觳獾牡团ǘ鹊哪勘闐,并在三碱基错配牟舛ㄉ舷允境隽己玫难≡裥浴同时,对实验的最佳检测条件进行了选择。在最佳条件下进行检测,得到了目标×。.。
关键词:丝网印刷以琢鱿赴氖侍迨侗鹨约癉序列的循坏复制替换为肇础构建的。这一检测方案分两步进行:首先,将适体铝蠨固定在磁珠上后与“信使序列”杂交,赴胝庖辉咏桓春咸褰岷系贾滦攀剐蛄蠨释放出来;将发卡序列固定在电极上,释放出的信使序列‘其“环”部分杂交,颈环部分被于,再与会纳米颗粒结合的引物咏恍纬稍咏桓春咸澹⒃贒复制酶、脱氧三磷酸核苷酸混合物,和镁离了存在⒁砸镂F鸬愕腄聚合反应,反应过程中形成一条与发卡探针:的新链,同时信使序列惶婊欢释放到溶液中,找到另一个发卡探针始新的循环复制。引物序列上的纳米金颗粒同时附有分子条码序列,其接腥牒せぃü剖钡缌糠ḿ觳饬被的氧化还原信号,进一步增强了检测的灵敏度。结合以上两种冈素,该感器可检测到牡团ǘ鹊娜毡闐,也可以检测溶液中含有鱿胞,并在三碱基错配牟舛╨娃示出良好的选择性。同时,对含有其他干扰细胞时该传感器也可以显示出良好的选择性。陔研究还对实验的最佳检测条件进行了选择。
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∷生物传感器简介采用丝网印刷技术制作电化学生物传感器是目自订用来制备能够一次性使用的电化学尘物传感器的丰要方法。丝网印刷是以丝网印版为模具,所的传感器电极的人小和形状都可以随意改变,并且使得丝网印刷电极的制作易于微型化和集成化⋯。丝网印刷技术的基本原理【】是,丝网印版图像部分的网孔能够透过油墨漏印至承印物上,印版溆嗖糠值耐妆欢滤啦荒芡腹湍ǎ诔杏∥锷闲纬煽瞻住丝网印刷考因其具有独特的性能如制作简单、价格低廉,便于携带,易于微型化和集成化等优点近年柬备受研究者的关注【俊=客∷⒓际跻氲化学生物传感器的制作中为阂祷峁┝艘惶跤惺导室庖宓男滤悸罚欣解决在体、在线分析中电极响应的蕈现性、稳定性和交叉污染等问题。,具有潜在的发展日订景和实际的应用价值。丝网印刷一次性电化学生物传感器已经应用于【孓‘临床检测、工业分析、食品分析和环境监测等方面。这种传感器的出现给生物医药、环境分析等提供了一个远离集中的实验室的机会。采用现代技术制得的一次性使用的丝网印刷电极集中了以上的特点及可携带性,便宜的制造技术等优点。最早的丝网印刷传感器主要集中在血糖的测定方面,从那以后其应用逐渐拓展到诸如生物分子、杀虫剂、离子及潜在的污染。丝网印刷电极的制备过程:逑吹缂ǎ俳渲糜娴母稍锵渲懈燥。诨迳嫌∷⒌嫉缬湍ê笾糜娴母稍锵渲懈稍印刷上碳浆后置于℃的干燥箱中干燥印刷上绝缘浆后紫外灯