文档介绍：钥筙射线诱导赴脑恋某醪窖芯泌溻年月日广州专名称肿瘤学学位申请人指导教师答辩委员会主席答辩委员会成员论文评阅人业南方医科大学级硕士学位论文
钥筙射线诱导赴鹕说初步研究硕士研究生:尤玮张积仁教授指导教师:摘要研究背景放射治疗是恶性肿瘤治疗的重要手段之一,但放射治疗在杀死肿瘤细胞的同时,不可避免地损伤正常组织,也因此限制了肿瘤放射治疗的照射剂量强度,导致肿瘤细胞不能被完全杀灭而使病人生存质量的下降。同时,随着医疗保健事业的发展和核工业技术的广泛应用,医源性辐射和非医源性辐射对正常组织细胞辐射损伤也正日益受到放射学家的关注。因而,细胞辐射损伤的机理及辐射损伤防护方面的研究已成为辐射分子生物学和辐射流行病学研究的的热点和重点之一、。国内外学者研究提示,辐射致细胞损伤的机理主要集中在如下几个方面:改变细胞信号传递途径:细胞经受辐射后,细胞内或细胞外多种信号分子受其诱导,引起信号传递途径的改变,最终导致细胞凋亡。其中,哂兄行牡匚作用【。鹕耍悍湟餌损伤,包括单链断裂⑺炊狭、碱基损伤和蛋白质交联等多种形式【俊赴芷诘骺兀褐饕Mü骺叵赴期/、疢调控点,调节细胞辐射敏感性和辐射抗性【。细胞鹕后,野生型蛴盏枷赴隚冢钡剿鹕薉修复,若损伤不被修复,蚓突罨盏枷赴蛲龅幕蜃B迹瓜赴⑸蛲。微环境变化:细胞的生存离不开其微环境,包括细胞氧供应、值、营养物质、代谢产物、硕士学位论文
方法目的离子平衡、细胞因子等,其微环境改变可引起相关基因表达和细胞对辐射的反应。随着细胞辐射损伤分子机制的深入研究,辐射损伤防护方面的研究也取得了较大进展。其中,有关辐射损伤防护剂的研究,近年来有较多报道,主要涉及以下几类:抗氧化剂,女】、康龋胞因子,如、、、】;微量元素,如硒、锌等浚中草药成分,如人参皂甘、迷迭香等【。但由于目前研究较多的抗氧化剂、靖弊饔么螅赴蜃幼饔猛缁氐阋约爸胁菀┏煞帜岩蕴纯,还没有一种较为理想的辐射防护剂应用于临床。寻找一种新的有效的毒副作用小的辐射防护药物对辐射防护仍具重要意义。,化学名为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,是细胞能量代谢重要辅酶,参与细胞氧化还原反应和呼吸链电子传递,在线粒体内接受电子传递还原成,通过电子传递能够抑制自由基生成,同时生成细胞代谢所需的此可能起到保护细胞免遭辐射损伤的作用。本研究采用细胞生物学和分子生物学方法,初步探讨辐射损伤防护作用及其机制,这对于进一步研究正常组织细胞的放射损伤机理和探寻一种新的有效的、毒副作用小的辐射防护药物具有理论价值和现实意义。本研究通过观察氧化型辅酶苑渌鹕说娜苏8蜗赴闘细胞的影响,初步探讨氧化型辅酶狗渌鹕俗饔眉捌浠啤=研究医源性和非医源性辐射损伤防护、寻求新型放射防护剂提供一种新的思路和手段。赴嘌胺肿檎H烁蜗赴闘细胞培养在含%胎牛血清的培养基中,置于、培养箱中培养。将赴治组:处理组中文摘要
┓ḿ觳獠煌ǘ萅噋对细胞增殖的影响培养基,在、孵箱中培养J占和照射组细胞照射后分别加入含和不含痬的一培养基;对照组细胞未照射,。湎哒丈洳捎咧毕呒铀倨鳎丈浼亮课,剂量率为/丈湓淳喟兄行木嗬。细胞以每孔痬又肿橹嘌澹/孔,细胞贴壁后去上清,加入/凑丈鲜鎏跫蠿线照射。照射后去上清,加入胎牛血清∈偷牟煌ǘ鹊腘,分别为、、/孑%嘌渲信嘌。用壬ǚḿ觳各浓度訪细胞增殖的影响。魇较赴羌觳庀赴蛲雎蔐细胞经胰蛋白酶消化后制备成单细胞悬液,以每孔×痬又钟孔组织培养板,軱,待细胞贴壁后去上清,加入/凑丈鲜鎏跫蠿线照射。照射后去上清,处理组和照射组分别加入含和不含痬的培养基,在。%跸渲信嘌。收集各组细胞,调节细胞浓度为×痬捎肁疨旧ǎ觳庀赴蛲雎省魇较赴羌觳庀赴芷谙赴悦靠×痬又钟孔组织培养板,,,加入冰冷的%乙醇固定,用流式细胞仪检测细胞周期各时相细胞百分比。魇较赴羌觳鈖、.鞍妆泶锇俜致史直鹗占鲜龃理的三组细胞,以%多聚甲醛溶液潭,破膜剂裂解细胞后分管、洗涤、离心后去上清,各管分别加入鼠抗人、单克隆抗体,混匀,孵育。洗涤离心后分别加入标记的抗鼠二抗,℃孵育,在流式细胞仪上检测蛋白表达百分率。硕士学位论文×/,
结果/谙赴丈渥橛攵哉兆橄啾菺期细胞数明显增加,佣┢谙赴、、活性测定分别收集个经过上述处理的三组细胞,按试剂盒说明书进行每步操作,另设未加细胞而其他操作一样的孔为空白对照组,通过酶标仪Σ舛ǜ骺孜舛萇怠干涞缇倒鄄霯细胞形态用デ碇窃谧缎卫胱庸苤兄圃熘屑浯缎孔的模具,加入收集处理的细胞,离心,%戊二醛固定、ワ八峁潭ㄋ毓定,酒精梯度脱水,环氧丙烷浸透,脂包埋,超薄切片,电子染色电镜观察。,行单因素方差分析,,加入ヌヅQG稀释的