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黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶及制备魔芋低聚糖研究.pdf

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黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶及制备魔芋低聚糖研究.pdf

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黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶及制备魔芋低聚糖研究.pdf

文档介绍

文档介绍:黑曲霉酸性�事毒厶敲讣爸票改в蟮途厶茄芯�‰值分别为���畉�����.�����畉����中文摘要���杷�阄觥!=锥蜗赐选�可达����干曲。���杷�阄觥!L荻认赐训氖侄畏椒ǎ�雍谇�笰�������对酶有明显的激活作用,�”对酶有较强的抑制作用,�������薄��薄�������得到的优化工艺条件为:魔芋胶��芤�浓度����事毒厶敲浮綛.���������.���是一种能水解甘露聚糖、葡甘露聚糖,半乳甘露聚糖和半乳葡萄甘露聚糖的主链��,�瓺�事哆拎�擒占�陌胂宋�孛福�饕@醋杂谖�生物。它是一种有一定戍用前景的新型:�礯��福�壳按嬖诜⒔兔富钚云ǖ偷娜毕荩�贾缕渖���应用成本高,限制了该酶的广泛应用。本论文较系统研究了发酵培养基组成和发酵条件对黑曲霉�一���⒔筒�傅挠跋欤�蠓�忍岣吡朔⒔兔富钚裕��倍悦感灾屎兔阜ㄋ��工艺进行了研究,为指导酶的工业化生产和应用以及进一步的分子生物学研究奠定了基础。通过单冈素试验、����.���实验和响应面分析法,确定了黑曲霉�������.�菌株锥形瓶�舼态发酵的最佳产酶培养基组成。为麸皮:豆饼粉�.��.��痝��渌�镏氏喽杂谕��物料的质量分数分别为魔芋粉�ィ琄���.�ィ�衩捉�%,����ィ�和�任�.�簂。�自然,培养温度��,静置培养��T谏鲜鲎钣盘跫�拢�镁�瓴�嵝�.甘露聚糖酶的最高酶活达����/�汕��任从呕�***⒔兔富钐岣吡�.�倍,是迄今为止所有报道中酶活水平最高的。通过曲盘�笮∈����烫�⒔屠┐笈嘌�匝椋�,即培养基最初料水比为��.��鹗紁�匀唬�又炙���相对于干物料���讨凶�料���愿闪霞�,分别于发酵����补水和翻曲,�℃培养��T诟锰跫�伦罡叻⒔兔富�采用磷酸缓冲液浸提、硫酸铵分部盐析、�����凝胶过滤层析、����阴离子交换层析以及���.������.�盘�⒔颓�蟹掷虢O�对分子质昔和疏水性质非常相近的��两种����酶活比例较大。纯化酶的同收率为�.�ィ�炕�妒����。采用��甈��缬竞虷��街植煌�椒ǘ源炕��主要组分��屑�ǎ�砻髌湮R恢执棵缸榉帧�运用��������汗�瞬阄龊蚐�—��电泳测得纯化酶的相对分子质革分别为���和����街址椒ú舛ń峁��疽恢拢�砻鞲妹敢缘ヌ逍问酱嬖冢籌�.��测得该酶的等电点为��,�.�ィ话被�岷�坎舛ㄏ允荆�炕�钢泻�拷细叩那拔逯职被�酸分别为����、����和����薪隙嗨嵝园被�幔�K嵝缘鞍住�对纯化酶酶学性质研究显示,该酶最适反应温度为�℃,�℃以下稳定;在测试的三个温度范围内,纯化酶最适反应口�稻��.��砻鞲妹肝K嵝悦福�妹冈趐�.��范围稳定。�”、��、��悦傅囊种谱饔媒先酰黄渌�鹗衾胱佣悦富钣跋觳淮蟆R陨闲灾视氪置甘匝榻峁��疽恢隆4炕�酶对槐豆胶半乳甘露聚糖和魔芋葡甘露聚糖的�值分别为���/�和���/�,对两种多塘的��ǎ�砻髂в蠓塾朊傅那缀土Υ笮��采用��法和��.�法对纯化酶水解槐豆胶半乳甘露聚糖的产物进行定性和定量分析,发现产物除少晕单糖甘露糖外,主要含有甘露二糖、甘蹯三糖,其二糖、三糖、四糖三类寡糖占总水解产物的�.�%。该结果与众多文献报道的相似,表明该酶为内切��事毒厶敲浮�以魔芋胶葡甘露聚糖为原料,采刖黑曲霉酸性��事毒厶敲赶嗝敢航�忻阜ㄋ�馓跫�难芯浚��疞,加酶鼙��幢魔芋胶,�℃水解��K�获酶解产物经薄板层析和��检测表明主要为低聚糖以及少鼙单糖。利用酵母发酵法去除其中的可发酵性单糖,可以大大提高酶解产物中魔芋葡甘露低聚糖的含量。本研究试验成功了一种新的魔芋胶酶解工艺,突破了魔芋胶粘度大所带来的屏障,解决了甘露江南人学博士学位论文�������.∞,���%,���.�ィ�������������������×���������
±苎塑墨——低聚糖生产工艺中最关键的问题,即将魔芋胶浓度从�~���提高至���疞,使工业化规模酶解魔芋胶生产甘露低聚糖成为可能。该魔芋甘露低聚糖的生产工艺尚未见报道·关键词黑曲霉,��事毒厶敲福�烫�⒔停�掷氪炕��秆�灾剩�阜ㄋ�鈚甘露低聚糖��
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