文档介绍：鞍子肭χ律窬笃诜⒂咀饔霉叵档难芯第一部分铅暴露大鼠空间学忆能力的变化摘要申请人姓名:常薇指导教师:陈学敏教授铅在工业上和日常生活中被广泛应用,而且铅在环境中不可降解,所以环境铅污染日益严重。铅具有很强的组织亲和性,对肝、脑、血液、免疫等系统均产生不利影响。铅影响神经系统的多种功能,它对神经发育的毒性作用一直是各国学者研究的焦点,尤其能影响婴幼儿和儿童发育的中枢神经系统佣斐芍橇Α记忆力、神经行为的障碍。然而,铅导致神经发育毒性的机制尚未阐明。哺乳类动物和线虫突变型细胞的特异基因表达研究证明,很多鞍子肷窬低撤⒂泄亍但铅暴露大鼠神经组织鞍椎谋泶锬J接泻胃谋湟约罢庵指谋溆肷窬笃诜⒂毒性的内在联系也未见报道。本实验试图从分子水平上揭示铅引起神经后期发育毒性作用机制。我们研究在孕鼠妊娠后期至哺乳期结束时段低剂量铅暴露情况下,白栽谧哟笫蟛煌区的表达模式的变化,并探讨这种变化与神经后期发育毒性的内在联系。本研究分四部分。研究内容及结果报告如下:目的:重金属铅具有很强的神经发育毒性,即使是低水平铅暴露,仍然可以损的流行病学研究和动物实验研究还表明,个体发育早期饕J腔吃校溉槠铅暴为实验对象,复制了围产期醋酸铅暴露动物模型,观察铅的神经毒作用,探讨其神华中科技大学同济医学院博士学位论文害发育中的神经系统,在儿童主要表现为学忆能力降低及行为发育异常。目前露所产生的认知和神经行为缺陷在停止铅暴露后可能持续到成年阶段。我们以大鼠易匀豢蒲Щ鹱手钅縉
第二部分铅暴露大鼠鞍自谥惺嗌窬低持表达的变化方法:雌鼠受孕后分笼饲养,并记录该鼠编号和受孕日期=皇茉经行为和学忆能力的变化。雌鼠随机分为椋孔只,妊娠第天开始将受孕雌鼠经饮水染毒,至仔鼠日断乳时终止对亲代大鼠染毒,子代大鼠恢复正常饮水。子代大鼠从胚胎晚期至出生后日断乳这段时间内,经亲代大鼠胎盘和乳汁实现铅暴露,具体分组如下:哉兆橐谜袅笏低剂量组饮用含疞醋酸铅水;屑亮组饮用含疞醋酸铅水;呒亮孔橐煤疞醋酸铅水。水迷宫实验是检测动物的空间学忆能力的一种方法,我们采取这种方法观察铅暴露是否对大鼠的认知能力造成影响。结果:随着染毒剂量的升高,大鼠寻找平台所用时间呈现明显增加的趋势,所经总路径也呈增加的趋势,,,。说明大鼠的学忆能力受到一定的影响。结论:通过水迷宫实验检测,发现铅暴露大鼠空间学忆能力下降,提示在胚胎晚期及出生早期的铅暴露已使大鼠的中枢神经系统已经受到一定程度的损伤。目的:易遄B家蜃又杏泻芏啾恢っ髟谏窬低车姆⒂凸δ苤衅鹆酥匾的作用。最早是因其在赴心艽碳っ庖咔虻鞍缀铣傻幕∩媳环⑾值模一B家蜃邮怯肦疨方法分离新的功能尚不清楚的B家蜃拥墓讨被发现的。这些因子都被证实在发育和成熟的神经系统中起了重要的作用。在铅暴露大鼠的脑组织中它们的正常表达是否受到一定的影响还未有研究,本实验试图从基因转录和蛋白质表达水平上进行观察,以期从分子水平上揭示铅引起神经后期发育毒性作用机理。方法:随机取各组仔鼠断头,制作冰冻切片,采用免疫组织化学从眯蛃华中科技大学同济医学院博士学位论文
、的;取各组仔鼠脑组织提取捎媚孀B济敢痪酆厦噶捶从觳釨结果:图像分析和统计学检验结果表明,与对照组相比,低铅组一免疫反平均灰度升高,。与对照组相比,低铅组免疫反应阳性神经元无明显变化,中铅组开始可见不同程度的变化,高铅组阳性面积比增加,平均灰度降低,。,与对照组相比,∧圆课晃醇飨员浠。∧晕结论:在本研究的铅暴露动物模型中,我们观察到在不同脑区,蘼凼基因表达水平还是蛋白表达水平都有不同程度的下降,:研究表明,.的峁褂虺说鹘谒隓的结合,也能诱导白虼薆艽俳窬そ獭GΡ┞洞笫笊窬V姓庑┫喙厣窬匾煨缘达水平上进行观察,以期从分子水平上揭示铅引起神经后期发育毒性作用机制。的。应阳性神经元无明显变化,中铅组可见不同程度的变化,高铅组阳性面积比减少,。凝胶图像分析系统对扩增产物的电泳条带进行密度分析表明,┰龀鯫一康奶醮。正常表达模式;同时我们观察到在不同脑区,蛋白表达水平都有不同程度的升高,提示铅可能干扰了的正常表达模式,并由此影响神经元的正常分化。那些蛋白产物很可能参与轴突生长的基因的表达热鏢鞍缀蜕窬康白的表达是否也发生了变化是我们关心的问题