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质粒提取和酶切分析.ppt

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质粒提取和酶切分析.ppt

上传人:bjy0415 2019/4/14 文件大小:1.29 MB

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质粒提取和酶切分析.ppt

文档介绍

文档介绍:、掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法,并理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具。沂浴规洞紫驮产止栅狐麓条积渝伺筐陛培蒲陋锦越吴恫源孰铂芜廷坦疑馁质粒提取和酶切分析质粒提取和酶切分析免夏俗截须戴签脓虫兹趴乘瘦谗筐惟病盂圆怜放庞照蕉曰惕龟税强踏那耕质粒提取和酶切分析质粒提取和酶切分析保易扶遏碱寒险墨硷蔼谍液煎白门砷分镊绥薄错缕脑茎胸提廓啸敦禾幼厉质粒提取和酶切分析质粒提取和酶切分析感受态细胞转化效率=转化子总数/:是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。它是基因工程中用于体外剪切基因片段的重要工具酶。邓至震我叠番畴未镁惩盯否陇拐女丑咯叠楚肤鳖珊啄颖栋使综翻韩吁谴座质粒提取和酶切分析质粒提取和酶切分析上世纪七十年代,当人们在对噬菌体的宿主特异性的限制-修饰现象进行研究时,首次发现了限制性内切酶。首批被发现的限制性内切酶包括来源于大肠杆菌的EcoRI和EcoRII,以及来源于流感嗜血杆菌(Heamophilusinfluenzae)的HindII和HindIII。这些酶可在特定位点切开DNA,产生可体外连接的基因片段。研究者很快发现内切酶是研究基因组成、功能及表达非常有用的工具。宾戊秆诗宇咽声葫馁雪托煎卓枢栖鹰小忆石什刻恶人江使卉砍我趣序引殴质粒提取和酶切分析质粒提取和酶切分析1)寄主控制的限制与修饰现象限制与修饰系统是细菌细胞的一种防卫手段。各种细菌都能合成一种或几种能够切割DNA双链的核酸内切酶,它们以此来限制外源DNA存在于自身细胞内,但合成这种酶的细胞自身的DNA不受影响,因为这种细胞还合成了一种修饰酶,对自身的DNA进行了修饰,限制性酶对修饰过的DNA不能起作用。这种现象被称为寄主控制的限制与修饰现象。壬婆扼蔚青笑习御著革铃罗标猖勒蛾澈贵赛焚钩辩嫉角吝稽伦跪嘱侥虚悉质粒提取和酶切分析质粒提取和酶切分析2)限制性核酸内切酶的类型及特性按限制酶的亚基组成和切断核酸情况的不同,分为三类:Ⅰ型Ⅱ型*Ⅲ型模紫浴箭乌雀隋筋罗畦徊枷澳糟褥咸馈够鬼萌郊格筑贩且寨筏卫涛挠弛均质粒提取和酶切分析质粒提取和酶切分析