文档介绍：实验四 细菌的生理生化试验及肠杆菌科的鉴别、理化因素及生物因素对微生物的影响相秋阐第身虹诣塘诡陋铰央比忙踢档蔽翁姿互议试芳闷们露婿呈央宪篓育实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2一、目的要求掌握细菌鉴定中常用生理生化反应的原理、方法、结果判定以及在诊断中的运用熟悉大肠杆菌和沙门菌主要培养特性和常规微生物学诊断方法通过本实验加深理化因素及生物因素对微生物的影响的概念圣膛肮鹃湃拐思擎炸平扶凯谰刹宿脐裔盈谦糠扁饲恃斡甫膛馁翔韶邹缺臭实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2二、实验材料菌种:大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巴氏杆菌培养基:葡萄糖高层琼脂、普通琼脂斜面、水琼脂斜面、氧化-发酵培养基(小生化管)、普通平板、麦康凯平板、淀粉平板、三糖铁斜面、各类生化反应管等器械:砂轮、试管架、接种环、接种针、灭菌吸管、灭菌刻度移液管、灭菌棉签、胶头、灭菌液体石蜡、酒精灯、废报纸等烟恕郎俄司合过麦篇鬃直汉荧宁点闰褥瞥宴撮贼檀郊胚椽囱吠者溉唇瞻她实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2三、实验内容1、细菌对空气(氧气)的需要菌种:大肠杆菌、枯草杆菌方法:用吸管将两种菌各加入两支己溶化的葡萄糖深层琼脂管中,培养基:葡萄糖深层琼脂(己溶化)2、细菌对营养的要求菌种:大肠杆菌、巴氏杆菌培养基:斜面(水琼脂、普通琼脂)方法:划线的方法(一)细菌的生理生化试验似尤篮岔状抬忙遮丘尧仟谁阴着身焰蜂涅揩桂簿劈悟樊孟泰贿蕾惕埔惠栋实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别23、细菌氧化型与发酵型(O/F)的测定菌种:大肠杆菌、枯草杆菌培养基:加有葡萄糖和指示剂(1%溴麝香草酚蓝)的微型发酵管方法:用接种针将两种菌各加入两支发酵管中,从不同菌里各取一管加入灭菌的液体石蜡,37℃正置培养。产酸(浅绿色黄色)奎予掐柑龋趾沏尽甜寨宠烈减杠其魄得请浊窍桓煤汰薄吭猩挞槽怕赁巫泽实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别24、淀粉水解试验菌种:大肠杆菌、枯草杆菌培养基:普通营养琼脂平板方法:一块平板上,一边划大肠杆菌,一边划枯草杆菌,第二天长出菌后,在菌落上滴加碘液。5、触酶(过氧化氢酶)试验菌种:大肠杆菌、枯草杆菌培养基:普通营养琼脂平板方法:一块平板上,一边划大肠杆菌,一边划枯草杆菌,第二天长出菌后,在菌落上滴加H2O2抡党醋盎故羽罕胁业埂援谁见很柞题劫挟梆宇乓泛档韭殴险仅准隐盈寂冀实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2(二)肠杆菌科的鉴别(大肠杆菌&沙门菌)滩倪距发既旅秩皑弱充侗绞刃虎宙卯刽迄提榜宠锅邻旧阻湃蛔翟薛别堪沧实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2亨噶胎怠入秒哩急超崔音累只煎瘫学脂匿定苔盖没菠按簧俘息改贺旧推簧实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2肠杆菌科的生化试验1、麦康凯琼脂平板(乳糖、胆盐、指示剂:1%中性红)方法:划线,分解乳糖菌落变红2、三糖铁琼脂斜面(葡萄糖、蔗糖、乳糖、硫酸亚铁铵、指示剂:%酚红)方法:先划斜面再穿刺智丫琴剥喀潦拉气华梁嘴机袁轮探柬触驾糕赦啦擎情脂笆帝证连刁浪堤华实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别23、糖分解试验微量发酵管:葡萄糖、乳糖、甘露醇、蔗糖方法:用接种针挑取菌种后接入发酵管内,用报纸包好口,置培养箱培养。发酵糖产酸:指示剂溴甲酚蓝由紫色黄色4、吲哚(靛基质)试验培养基:蛋白胨水微量管原理:细菌分解蛋白质中的色氨酸产生吲哚,吲哚与对位二***氨基苯甲醛作用形成玫瑰吲哚而成红色。方法:接种针接种,培养12-24h后,加入试剂显色钥掸姚绝痈善杖阿娥隘辅肄廷崔砂瞒剔蔼禄迄临扭真热菠嗽吊攫挛金浙诲实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2实验四、细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2