文档介绍：正交实验法研究铁皮石斛原球茎分化影响条件[摘要]利用6-BA、IBA、NAA和外源添加物四个因素三水平进行L9(34)正交实验,,结果表明:当6-BA的浓度为2mg/L、、(50g/L)时,原球茎最易于分化成丛生小苗;影响原球茎分化程度的因素依次为6-BA浓度﹥外源添加物﹥NAA浓度﹥IBA浓度。[关键词]铁皮石斛;组织培养;原球茎分化;正交实验。(.)为兰科石斛属多年生附生型草本植物,别名铁皮兰,因其茎节处呈黑褐色,又名黑节草[1]。利用石斛茎尖组织培养无病毒植株的无性繁殖技术创立以来,石斛组织培养技术逐步走向深入化。目前,有关铁皮石斛的原球茎分化和生根条件的研究大都基于单因素试验,如不同培养基、激素浓度、无机盐浓度、碳源、pH等以及香蕉、马铃薯等附加物[2]。但是铁皮石斛原球茎分化及生根受培养基中综合因素的共同影响,、克服培养基配方设计的盲目性、大大提高工作效率和试验的可靠性。,,有关铁皮石斛的原球茎分化和生根条件的研究大都基于单因素试验,如不同培养基、激素浓度、无机盐浓度、碳源、pH等以及香蕉、、克服培养基配方设计的盲目性、,还相继在兰科植物中得到了应用[3],-BA、IBA、pH和培养基种类、琼脂浓度、KCl浓度各三因素三水平及空白对照分别设计两套L9(34)正交实验[4],,谭文澄等就进行铁皮石斛兰组织培养研究并获得完整植株。到今天,铁皮石斛的组织快繁依然是热点。归纳起来,当前铁皮石斛的组织快繁可分为种子无菌萌发、试管苗原球茎发生和试管苗器官发生3种途径。袁正仿等将铁皮石斛带茎节的茎段接种于培养基上(N6+·L-1BA)诱导茎节发芽,再将芽接种于培养基上(N6+·L-1BA+·L-1IBA)诱导出原球茎,并指出只有将诱导出的小植株再诱导,诱导出大量的原球茎,才能扩大其繁殖。秦廷豪用铁皮石斛茎段、带顶芽的茎段和根蔸3类外植体在培养基上(MS+·L-16-BA+·L-1NAA)培养,仅根蔸能诱导出原球茎。王春等研究表明,铁皮石斛原球茎诱导最佳培养基为1/2MS+·L-1BA+·L-1NAA,诱导率为58%。王丽萍等研究表明,选用铁皮石斛幼嫩茎段为外植体诱导出原球茎的最佳培养基为MS+·L-16-BA+·L-1NAA+·L-12,4-D。。,BA相对于其他激素对铁皮石斛原球茎诱导效果最好,·L-1BA诱