文档介绍：正相液相色谱蒸发光散射法测定食品中的石蜡
作者:盛旋胡艳云张蕾孙昊郑屏陶发荣杨嫣嫣杭吉
【摘要】采用液相色谱(HPLC)结合蒸发光散射检测器(ELSD)对食品中的石蜡残留物进行了分析和检测。利用正相色谱柱对石蜡和非石蜡组分进行了分离,而无需对石蜡组分进行逐一分离。利用t检验,对构成石蜡的烷烃组分在ELSD检测器上的线性响应进行了显著性误差分析,结果显示,石蜡中烷烃组分具有相似的线性响应。以此为定量依据,实现了食品中石蜡含量的快速定量分析。并对HPLCELSD的检测和确证结果与GCMS法进行了对比。方法的线性范围为10~500 mg/L,; 检出限为1 mg/L。以10, 50和100 mg/kg浓度水平添加石蜡时,%~%之间,%~%。
【关键词】石蜡, 蒸发光散射, 液相色谱, 食品
1 引言
石蜡是一种石油产品,H2n+2(n=14~34)组成。石蜡可以在食品包装材料中使用,但石蜡分解出的低分子化合物,容易引起人体肠胃功能紊乱、腹泻,长期摄入会降低免疫功能,引发人体细胞变异疾病,危害健康[1]。因此国标2760《食品添加剂使用卫生标准》中严格规定了石蜡的用途和使用范围,一是用作食品工业的加工助剂,但在制成最后成品之前去除;二是作为基础剂物质在胶基糖果中适量使用[2]。由于石蜡能改善食品的某些感官性能,可以降低食品生产成本,因而将石蜡滥用于各类食品中的事件时有发生。如增加火锅底料硬度,在大米、瓜子等产品中抛光增加光泽,增加粉丝的韧性和光泽[3],浸涂菇种菌棒(俗称
“蜡棒”)生产蜡菇降低成本等。为有效监控食品中石蜡残留水平,建立食品中石蜡残留量的分析方法具有重要意义。
目前,关于食品中石蜡的测定方法已有文献报道。皂化目测法[4,5],利用样品直接皂化液或样品提取液的皂化液中石蜡会产生浑浊或小油珠现象,来判断样品中是否含有石蜡,方法简单,但灵敏度不高;溶剂溶解法[4],通过观察用特定溶剂溶解的样品溶液是否浑浊来进行鉴别,方法检出限高, 受人为因素影响大;DSC测定熔点范围法和质构仪测定硬度法[4],这两种方法是利用温度曲线波动和硬度曲线波动的方法来鉴别产品中是否含有石蜡,方法的分析时间相对较长。除以上的物理测定方法外,还有薄层色谱法[3,4]、红外光谱法[5,6]、气相色谱法及气相色谱质谱法[1,7,8]。薄层色谱和红外光谱法,方法简单,定性分析好,但受样品基体组分的影响较大,定量分析也不准确;气相色谱法和气相色谱质谱法(GCMS)具有较好的分离度和选择性,但气相色谱的方法在对多组分的石蜡进行定量时,通常需要将石蜡中每个组分逐一利用外标法进行定量,然后再加和计算总量。由于石蜡组分复杂,这种定量方法需要配制大量的标准溶液,工作量和实验成本都较大。文献[9]采用液相色谱
蒸发光散射检测器测定食品包装材料中的石蜡化合物,并利用傅里叶变换红外光谱法进行定性分析。蒸发光散射检测器是一种通用型检测器,可检测挥发性低于流动相的任何样品,是测定无发色基团化合物的一种较好的方法。
本研究采用正相液相色谱(HPLC)结合蒸发光散射检测器(ELSD)对食品样品中的石蜡残留量进行了分离和检测。通过控制色谱条件,对石蜡组分和非石蜡组分进行了有效分离。在石蜡中烷烃组分具有相似的线性响应的基础上,将石蜡中所有烷烃组分作为一个整体进行分析和定量,弥补了利用石蜡特征组分进行定量时检出限高、结果不准确的缺陷。同时由于方法无需对石蜡组分中的每一个化合物逐一进行分离和检测,有效地缩短了分析时间。本方法简单、快速、灵敏度高,可以用于食品安全质量控制。
2 实验部分
仪器与试剂
ACQUITY UPLC system高效液相色谱仪(美国Waters公司),配蒸发光散射检测器;6890N气相色谱5973N质谱联用仪(美国Agilent公司);R210/V810旋转蒸发仪(瑞士Buchi公司);NEVAP 112氮吹浓缩仪(anomation公司);超声仪(美国NEY公司)。
全精制切片石蜡(CAS 8002742,熔点自52~64 ℃各系列,阿拉丁试剂有限公司);正二十二、二十五、二十八、二十九、三十、三十一、三十二烷标准品(纯度大于99%,美国 Fluka公司);正己烷、乙酸乙酯、无水乙醚(均为色谱纯,美国Tedia公司);石油醚(沸程30~60
℃)、无水Na2SO4(分析纯,国药集团上海化学试剂有限公司,使用前经650 ℃灼烧4 h后置于干燥器中备用); μm PTFE针头滤膜(美菇、西瓜子样品均采购自市场。
仪器条件