文档介绍：余甘子叶中槲皮素的定性定量分析研究
作者:钟振国,李学坚,董明姣,刘布鸣,陈明生,
林霄,韦燕飞,韦勇汉,陆盛胜,黄金兰,罗雪菲,钟益宁
【摘要】目的对余甘子叶中槲皮素进行分析研究,建立定性定量分析方法,为余甘子叶的质量标准制定提供方法和依据。方法采用薄层色谱进行定性鉴别;采用液相色谱测定余甘子叶中槲皮素的含量:色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-%磷酸(50∶50), ml/min ,检测波长为360 nm,外标法定量。结果槲皮素在10~100 μg/ml范围内呈线性关系,%(RSD=%,n=9);分别对不同产地的样品进行了测定。结论该方法简便、准确,专属性强,重现性、回收率好,可作为余甘子叶药材的质量控制方法。
【关键词】余甘子叶;槲皮素;薄层色谱;液相色谱
余甘子叶为大戟科叶下珠属植物余甘子Phyllanthus embllca ,余甘子树广泛分布于我国的广西、广东、福建、贵州、云南等地。余甘子为传统民族用药,具有清热凉血、消食健胃、生津止咳之功效,用于治疗血热血淤、消化不良、腹胀、咳嗽、喉痛、口干[1]。余甘子中含槲皮素[2],但对余甘子叶未见研究报道。我们研究发现余甘子叶中也含槲皮素,本实验采用薄层色谱法和液相色谱法,以槲皮素为对照,对余甘子叶进行了定性定量分析方法研究,并对不同产地的样品进行了分析比较,为该植物的进一步开发利用提供基础化学数据,为余甘子叶药材及其制剂的质量标准研究奠定基础和依据。
1仪器与材料
1仪器与试药
美国Waters 515 HPLC Pump、2487 DualλAbsorbance Detector液相色谱仪,威玛龙色谱工作站;KQ5200B型超声清洗器;硅胶G,青岛海洋化工厂;槲皮素对照品(756-200211,由中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用);水为超纯水,甲醇为色谱纯;其它试剂均为分析纯。
,经广西中医学院刘寿养教授鉴定为大戟科叶下珠属植物余甘子Phyllanthus Embllca ,晾干。
2方法与结果
,称取1 g,加70%乙醇50 ml水浴回流1 h,取出,滤过,滤液蒸干,残渣加40 ml水充分溶解,滤过,滤液用乙醚萃取2次,30 ml/次,弃乙醚层,水溶液加5 ml稀盐酸回流1 h,取出,用冷水立刻冷却,滤过,滤液再用乙醚萃取2次,30 ml/次,收集乙醚提取液,滤过,蒸干,残渣用1ml醋酸乙酯溶解,作为供试品溶液。作另取余甘子叶对照药材同法制成对照药材溶液。再取槲皮素对照品,加甲醇制成毫升含1 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法[3]试验,吸取上述各种溶液各1~2 μl,分别点于同一含羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶2∶1)为展开剂,展开,取出晾干,喷以2%AlCl3乙醇溶液,105℃烘至显色,置365 nm灯下检视。供试品色谱中,在与对照药材和对照品色谱相应的位置上显相同的黄色荧光斑点,Rf=,见图1。经多批样品试验,薄层色谱的重复性好,可作为余甘子叶的定性鉴别方法。1、2、