文档介绍：余甘子叶中的没食子酸的定性定量分析研究
作者:钟振国,李学坚,董明姣,刘布鸣,陈明生,韦勇汉,陆盛胜,钟益宁,黄金兰,韦小清
【摘要】目的对余甘子叶中的没食子酸进行分析研究,建立定性定量分析方法,为余甘子叶的质量标准制定提供方法和依据。方法采用薄层色谱进行定性鉴别;定量方法采用液相色谱测定余甘子叶中没食子酸的含量:以C18柱,流动相:甲醇-%磷酸(3∶97); ml/min ;检测波长为269 nm;外标法定量。~ μg范围内呈线性关系,%(RSD=%);分别对不同产地的样品进行了测定。结论该方法简便、准确,专属性强,重复性、回收率好,可作为余甘子叶药材的质量控制方法。
【关键词】余甘子叶没食子酸薄层色谱液相色谱
余甘子叶为大戟科叶下珠属植物余甘子Phyllanthus embllca ,余甘子树广泛分布于我国的广西、广东、福建、贵州、云南等地。余甘子为传统民族用药,具有清热凉血、消食健胃、生津止咳之功效,用于血热血瘀、消化不良、腹胀、咳嗽、喉痛、口干[1]。余甘子中含没食子酸并作为检测指标[1],但目前对余甘子叶的化学研究不多,其分析方法研究未见报道。本课题组采用薄层色谱法和液相色谱法,以主要成分之一的没食子酸为对照,对余甘子叶进行了定性定量分析方法研究,并对不同产地的样品进行了分析比较,为该植物的进一步开发利用提供基础化学数据,为余甘子叶药材及其制剂的质量标准研究奠定基础和依据。
1 器材
仪器与试药
美国Waters 515 HPLC Pump、2487 DualλAbsor
bance Detector液相色谱仪,威玛龙色谱工作站;KQ5200B型超声清洗器;硅胶G,青岛海洋化工厂出品没食子酸对照品(110831-200302),由中国药品生物制品检定所提供;水为超纯水,甲醇为色谱纯;其它试剂均为分析纯。
样品
余甘子叶采自广西各地,经广西中医学院刘寿养教授鉴定为大戟科叶下珠属植物余甘子Phyllanthus embllca 。晾干。
2 方法与结果
薄层色谱鉴别
取余甘子叶粉碎,称取2 g, h,滤过,滤液用盐酸调pH值至2,用乙醚连续萃取两次,取乙醚层,挥干,残渣加醋酸乙酯1 ml使溶解,作为供试品溶液。另取余甘子叶对照药材同法制成对照药材溶液。再取没食子酸对照品,加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述各种溶液各1~2 μl,分别点于同一含羧甲基纤维素纳为粘合剂的硅胶G薄层板上,以甲醇(水饱和)-甲酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)为展开剂,展开,取出晾干,喷以5%FeCl3溶液。供试品色谱中,在与对照药材和对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点,Rf=,见图1。经多批样品试验,薄层色谱的重复性好,可作为余甘子叶的定性鉴别方法。
含量测定
液相色谱测试条件色谱柱:迪马C18柱,流动相:甲醇-%磷酸(3∶97), ml/min,检测波长269 nm,柱温室温,进样量10 μl。
色谱条件与系统适用性实验检测波长:取没食子酸对照品适量,以流动相为溶剂,用紫外分光光度计在