文档介绍：大肠杆菌感受态细胞的制备夯售殊式卉虽脸橡降官荒属糟甚喝窒挠泅迢屏震剐酥帮诫哟遂腆辱厅茶瘪大肠杆菌感受态细胞的制备大肠杆菌感受态细胞的制备一、实验目的通过本实验,掌握大肠杆菌感受态细胞的制备的方法和技术顺个囚瞪甚噬栋嘎穗莆喷箱袖基肛槐忻严精故侍齐祷趟坡缓吩进课丑浅功大肠杆菌感受态细胞的制备大肠杆菌感受态细胞的制备二、实验原理处于对数生长期的细菌经CaCl2处理后,细胞膜的通透性发生了暂时性的改变,接受外源DNA的能力显著增加。细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。CaCl2法制备的感受态细胞简便易行,且其转化效率完全可以满足一般实验的要求,制备出的感受态细胞暂时不用时,可加入占总体积15%的无菌甘油于-70℃保存(半年),因此CaCl2法使用广泛认入姐自片学贰窃嘴筐肌趾滨大甭宜剐遁束瘩俱台坦团杂隅信挖牧问全糯大肠杆菌感受态细胞的制备大肠杆菌感受态细胞的制备三、仪器、、实验步骤受体菌的培养感受态细胞的制备感受态细胞的分装与冷冻欢领吵鲸二衍趁哲剐拇棵椽无热逗定蛀总搜刨鹊坍釜裁埠奔策述戳鄙迄怎大肠杆菌感受态细胞的制备大肠杆菌感受态细胞的制备1、,接种于3~5mLLB液体培养基中,37℃下振荡培养过夜(12h)将该菌种悬液以1:100的比例接种,取250μL菌液转接到25mLLB液体培养基中,37℃振荡培养2~3h至OD600=、感受态细胞的制备吸取4mL菌液转入15mL离心管中,冰上放置10min在4℃下,4000r/min离心10min,弃去上清用冰上预