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免疫学杂志第卷第期年月... 。。
文章编号—
人源轮状病毒转基因马铃薯口服免疫小鼠的免疫应答研究
李晋涛,费蕾,牟芝蓉,唐艳,魏静,吴玉章第三军医大学全军免疫学研究所,重庆
摘要目的分析人源轮状病毒转基因植物抗原的口服免疫应答反应。方法在根癌脓杆菌介导获得系列转基因
马铃薯植株的基础上,用分析转基因马铃薯中目的蛋白表达水平。马铃薯块茎直接口服免疫/小鼠,分析免
疫小鼠血清、唾液、粪便提取物特异抗体水平。结果获得一株最高表达量的转化株;口服免疫可诱导较强的血清反应和
强烈的黏膜反应,粪便的最高,唾液次之,尿液中无;加霍乱毒素亚单位佐剂免疫组小鼠和霍乱毒
素佐剂免疫组小鼠抗体水平无显著差异,无佐剂免疫组小鼠抗体水平略低。结论人源轮状病毒转基因植物疫苗联合黏
膜佐剂免疫动物可诱导特异的系统与黏膜免疫应答,且黏膜免疫强度略高于系统免疫。
关键词轮状病毒;口服免疫;转基因植物疫苗;马铃薯
中图分类号文献标识码
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人源轮状病毒是导致婴幼儿腹泻的主要略因其安全性好、经济价廉、便于运输和可以口服等
病原物,~岁婴幼儿可能一次或多次受感染, 特点而备受关注。在以往的研究中,我们建立了
尤以岁左右的婴幼儿发病率最高】。全世界每年转基因植物的转化体系,成功地将组轮状病毒
由致病并死亡的人数近一百万人。已有的研的保护性抗原基因转人马铃薯植株,并获得稳
究和临床实践表明,轮状病毒迄今尚无有效的治疗定性表达。本研究在获得转基因马铃薯的基础
药物,而且常规性预防措施的预防效果十分有限。上,直接将马铃薯块茎免疫试验小鼠,对其所产生的免
因此,开展疫苗预防接种的方法被视为目前最有效疫应答进行了研究,并就此对转基因植物疫苗直接口
的途径,发展轮状病毒疫苗被列为的长期战略服的应答机制进行了探讨。
目标。亚单位疫苗是近年来疫苗研究的一个
材料与方法
主流方向,以转基因植物作为表达反应器的研制策
. 实验材料雌性级/小鼠, 周
收稿日期——;修回日期一—龄,体质量~,由中国医学科学院实验动物中
基金项目国家自然基金、和重庆市科委—心提供。转基因马铃薯块茎由本所提供。
资助项目
. 主要试剂霍乱毒素,和霍
作者简介李晋涛一,女,四川峨眉山市人,副教授,博士,主
乱毒素亚单位, 、
要从事病毒免疫和转基因植物疫苗的研究。.
; Ⅱ.ⅡⅢ..饥分离液、四甲基联苯胺舳、邻苯二氨、明
通讯作者胶【,细胞培养液、细胞培养板】,
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· · 免疫学杂志第卷
辣根过氧化物酶标记、深圳晶美,抗抗入到基因组的位点理论上是不同的,当插入的位点
体、荧光标记的抗抗体深圳晶美。属于基因表达活跃区,则外源基因表达水平较高,反
. 抗原制备对反复经过选择压筛选的株转之亦然。因此,外源基因的表达必然存在差异。
化苗进行了编号,并在室内进行组织培养无性扩增
繁殖,然后移栽到室外阳光大棚中。阳光大棚中栽
培的转基因马铃薯按照普通马铃薯进行管理,待其
块茎生长成熟后收获,用清水洗净泥土,通风处晾