文档介绍：博士研究生学位论文
中国协和医科大学研究生院
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“.甌庇ξ!皃】畇甐”;“!爸一”。勘误表第常旱诙蔚行,“第一种”应为“第一二种”。第页:“”应为“畇.”,“甭刮!,第一段,“。”席为“’”。第页,第二二段,“柱上复性”戍为“透析复性”。第页,最后一行:“每孔.,约,鱿赴靠住保ξ!懊靠或”。第页,第二段,“”应为“”,第三段,“”应为“”。第页,表“免疫剂量”应在第~行。第页,第一段:“孔板每孔接种甭槲!装迕靠捉又或保弧懊靠细胞数为×觥保ξ!×觥5诙危第五段:“图庇ξ!巴薄第页,第一段,“图庇ξ!巴薄5诙危巴”应为“图—”。第页,倒数第二行:“表庇ξ!氨”。第页,“用免疫小鼠血清及肠黏液检测免疫组化试验结果”应为“免疫小鼠血清及肠黏液的免疫组化试验检测结果”。第页,表河ψ⒚骺固宓味任狦。第页,第校叭姿嵛刈R泼浮甭槲!岸姿嵛剀兆R泼浮保坏行:戍为“与控制分泌途径相关的蛋白都是保守的”。第页,第一段,应补充“肌肉注射途径免疫诱导产生的肠道攵哉兆槲尴灾钜臁保最后一段,“的乳汁里”应为“乳汁里的”。第页,第一行:“表达”二二字麻删除。第页,第二段,“尚部”麻为“尚不”;“基囡全长甭榉旁凇按┠ぬ堑鞍住敝蟆
摘要是为了使野生型蚧竦锰腔坏种修饰是除在艘胄藕由于轮状病毒,鸬挠び锥剐褐两衩挥刑匦е疗药物,因此研制疫苗仍是预防该疾病的热点。目前轮状病毒疫苗的研制有减毒活疫苗,基因工程亚单位疫苗,遗传重组疫苗,核酸疫苗以及基因工程载体疫苗。无论何种形式的疫苗,其目的都是要刺激机体产生特异性免疫反应。作为消化道感染性疾病,特别希望能诱导局部分泌性免疫。本论文就轮状病毒重要中和抗原琕蜃隽嘶蛐奘危及原核和真核系统的表达研究;对修饰后表达产物免疫原性进行了评价。锹肿床《镜耐饪堑鞍祝哂醒D亍⒉《疚健⒕龆ú《径玖等多种功能。我们的研究选择了轮状病毒株蜃魑D康幕颉株的虺ざ任黾罨墒斓鞍子个氨基酸,分子量为左右。为了探讨提高抗原免疫原性的可能性,我们通过两种方式修饰了颉5谝恢中奘问窃赩基因的艘来自于小鼠吹姆置谛藕烹男蛄蠸,,还在’端引入来自人类分子吹’端部分俏猄甐.,目的是使获得糖基化的虬夥置冢并停留于细胞膜,拟提高免疫原性。两种修饰基因都以基因组的构型引入,信号肽序列有一个内含子,而转膜基因含有两个内含子。表达之后,个氨基酸的信号肽序列将被切除,而转膜基因的个氨基酸将保留下来。表达之后,由于存在信号肽的作用,惶腔肿恿吭鲋右。我们将修饰后的蚩寺≈链┧笾柿V校胂俨《驹靥骞沧H中国瓶普圃褐心啃廷洗笳艵掌±物掌目究所博±日兜生论文
型腺病毒经相同途径免疫。在此基础上,我们研究了这两种重组腺病毒经珿直鹞##,还需要更多的试猫类,貂类等动物与人类不同,乳汁中的峭üΦ郎掀は赴胄赴粗刈楹螅康幕虿迦階型腺病毒载体腅区。我们评价了通过滴鼻、肌肉注射和口服三种途径免疫小鼠后,这两种重组腺病毒诱导产生闢特异的血清⒊Φ繧、固以及诱导产生扇潘氐哪芰Α6哉兆橛孟俨《驹靥錺衍生的滴鼻、肌肉注射和口服途径免疫母鼠后,对新生乳鼠的被动免疫保护效果。结果发现,在免疫后第埽庖咝∈蟮难G錓抗体达峰值。;口服免疫..琒甌;肌肉注射免疫为..为.>臣蒲Х治觯街种刈橄俨《居盏疾难G挥邢灾钜。而与对照组相比,,·为:。变化与血清揭恢拢诿庖吆蟮周达峰值,其中滴鼻组与口服组的肠道接攵哉兆橄啾扔邢灾牟钜,而肌肉注射组肠道接攵哉兆橄啾任尴灾牟钜臁我们没有在免疫小鼠的脾细胞中检测到有效的扇潘厮剑赜谖验才能确定。被动免疫保护是预防轮状病毒感染腹泻的一条重要途径。鼠类,牛,中掌科掌院中日∞巾迫埔秸粕镎葡癋究所博±可畚
怀孕的母鼠经以上滞揪睹庖吆螅律∈笤诔錾至欤肿床《維甃恐豢诜セ鳎臣天内乳鼠的腹泻情况,结果发现,经滴鼻免疫的母鼠所生的小鼠无腹泻症状,保护率为和固澹伪敲庖咚盏疾目固逅浇细摺J匝榉⑾郑庖咦樾可以抵抗的攻击。因此乳汁中存在的轮状病毒特异的中和抗体为了评价重组盏嫉闹泻涂固逶谔逋庵泻蚏哪芰Γ颐抢,,中和抗体滴度为。脱水,引起较严重的腹泻和肠道动力的改变。这些病理学特征与轮状病毒能够引起小鼠的腹泻症状。为此,我们构建了表达蛋白的毕赤酵母中日日:肆蝌学院中日协科艵掌生物掌克垦芯可畚生儿血液循环的。因为这些动物的