文档介绍：名词解释::启动子(promoter)是基因表达调控的重要顺式元件,是DNA链一段能被RNA聚合酶识别和结合并能起始mRNA合成的DNA序列,位于结构基因转录起始点上游。:基因工程是指将一种或多种生物体(供体)的基因在体外进行剪切和组合,然后与载体拼接,并通过载体转入到另一种生物体(受体)内,使其按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。:在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件,使目的基因能够表达的载体。:DNA分子通过与细胞膜结合进入受体细胞并在细胞内稳定维持和表达的过程。:外源DN***段插入到载体的选择标记基因中而使此基因失活,丧失其原有的表性特征。:酵母人工染色体,是进行大片段克隆的线状载体。:当温度突然降低时,反应体系中寡核苷酸引物和其互补的DNA模板在局部形成杂交链。:是以特定的组织或细胞mRNA为模板,逆转录形成的互补DNA与适当的载体连接后转化受体菌形成的重组DNA克隆群。:多个限制酶的单一切点,即多克隆位点。:有些来源不同的限制酶,识别及切割序列各不相同,但产生出相同的粘性末端,这类限制酶称为同尾酶。:考斯质粒是一类人工构建的含有λDNAcos序列和质粒复制子特殊类型的载体。12穿梭载体:是指能在两种不同的生物中复制的载体。:利用土壤根癌农杆菌中存在着一种诱导瘤细胞的质粒构建成的载体。:从特定生物个体中分离的全部基因,这些基因以克隆的形式存在(人工构建)。:蛋白质的N未端由原核DNA序列或其他DNA序列编码,C端由真核DNA的完整序列编码,蛋白质由一条短的原核多肽或具其他功能的多肽和真核蛋白质结合在一起,故称融合蛋白。:是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。:一种能将脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)加到某DN***段上3′-OH基上的酶。:催化有机单磷酸酯水解为磷酸和甘油的非特异性酶。:来源于稻谷曲霉,是一种高度单链特异的核酸内切酶,催化降解单链DNA或单链RNA,产生以5′-磷酸基末端的单核苷酸或寡核苷酸的酶。:由于循环次数增加,引物、dNTPs被消耗,酶活性下降,退火时模板互补链间的复性也逐渐增加,扩增效率下降,扩增产物由指数形式变成线性形式,最后出现平台效应。:是指由生物基因组或基因组文库中的已知序列出发,逐步探知其旁邻的未知序列或与已知序列呈线性关系的目的序列的核苷酸组成的方法和过程。:又称反向重复序列,它在DNA或RNA中形成发夹结构,在DNA中有可能形成十字形结构。:以修饰受体细胞遗传组成并表达其遗传效应为目的的基因。:能切割同一靶序列识别的限制性内切酶。:衰减子是指mRNA分子的前导序列(翻译起始点到5’端间的距离)中控制蛋白质合成速率的调节区。:在mRNA上起始密码子AUG上游4-13个核甘酸之前有一段富含嘌呤的序列,其一致序列为AGGAGG,能够与16srRNA3’末端的富含嘧啶的序列结合。-互补:LacZ′基因编码的α肽链与失去了正常氨基端的β半乳糖苷酶突变体互补,形成的有功能活性的β半乳糖苷酶,这种现象称为α互补。PACE基因组文库简并序列CDNA-RDASSH基因的化学合成DNA体外重组同聚合物加尾法衔接物转化感受态细胞感染转染筛选增强子沉默子终止子衰减子核基质结合区核酸酶限制性内切核酸酶粘性末端平末端同切点酶酶的星号活性DNA连接酶DNA聚合酶5’→3’聚合酶活性3’→5’外切酶活性5’→3’外切酶活性TaqDNA聚合酶末端脱氧核苷酸转移酶外切核酸酶脱氧核苷酸酶1核糖核酸酶A载体克隆载体表达载体质粒载体质粒的不相容性噬菌体载体黏粒克隆载体噬菌粒载体人工染色体质粒表达载体大片段表达载体RNAiVIGS简答题:影响限制性内切酶活性的因素有哪些?(5分)DNA样品的纯度、DNA样品的***化程度、核酸内切酶的缓冲液性质、DNA的分子结构、酶切消化反应的温度作为基因工程的载体应具备哪些条件?(4分)(1)具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性(可转移性)(2)具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点(3)具有较高的外源DNA的载装能力(5)具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点(6)具有合适的筛选标记YAC载体包含有哪些元件?(5分)酵母DNA的端粒(TEL)、DNA复制起点(ARS)、着丝粒(CEN)和必要的选择标记(HISA4和TRP1),构建成YAC克隆载体。基因工程受体细胞应具备的条件?(1)限制