文档介绍：新型生物传感技术用于端粒酶活性的检测湖南大学硕士学位论文楚霞数援丝堂丝王堂瞳盆抚化堂学校代号:学密级:学位申请人姓名:韭壹导师姓名及职称:培养单位:业名称:论文提交日期:生堇目论文答辩日期:生§旦ǖ答辩委员会主席:昱海蕴教援号:专.
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黼型么日期。叫年岁月罗学位论文版权使用授权书日期:圳年歹月季日期:纱年纾湖南大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。⒈C芸冢年解密后适用本授权书。⒉槐C芡拧朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉啊獭作者签名:本学位论文属于导师签名:
摘要性外,还具有本身的特征一一防止扩增产物之间的相互竞争。第四章基于蝎型探端粒酶是一种特殊的酆厦福哂心孀B济富钚裕芤宰陨淼腞为模板,以端粒┒宋R铮铣啥肆V馗吹ピ猅T谡H颂逑赴校粒酶的表达较低。但是在恶性肿瘤细胞,端粒酶的表达较高芪职┫赴肆的长度,使其无限制扩增F穹⑾纸サ闹琢鱿赴加卸肆C富钚裕肆C是目前最广谱的恶性肿瘤的预警标志物,已成为当今肿瘤诊断的新标志物和肿瘤治疗的新靶点。因此,对端粒酶的检测具有重要意义。诙轮蟹⒄沽艘恢掷媚擅捉鸱糯蠹际醯缁Х椒ㄓ糜诙肆C富钚缘检测。该方法通过在金电极表面组装一条巯基捕获探针肆C傅囊镄蛄,在端粒酶的作用下,对捕获探针进行扩增,纳米金标记的秸胗肜┰鲂蛄谢补杂交,利用电活性物质亚甲基蓝可以嵌入春臀侥擅捉鸨砻娴奶氐憷实现信号的输出,进而实现对目标物活性的检测。该方法快速准确、操作简单,灵敏度较高。谌轮醒兄屏艘恢只谕馇忻阜糯蟮挠ü馍锎ǜ屑际跤糜诙肆C富性的检测。该方法设计了一条端粒酶的引物探针,一条标记有一个荧光基团和一个猝灭基团的探针。在端粒酶存在情况下,引物探针进行扩增,扩增序列与探针可以互补杂交,形成双链。然后用核酸外切酶恢种蛔饔糜谒链已’’方向催化去除ズ塑账,沿双链痏较虼呋コ’单核苷酸,使荧光基团和猝灭基团分开,从而荧光得到恢复。由于核酸外切酶只水解吹’单核苷酸,因此端粒酶的扩增序列可以继续结合探针,可以循环利用,进而实现对信号的循环放大,大大降低了检测下限。该方法具有快速,选择性好,灵敏度高,操作简单和背景干扰较低等优点。吞秸胧且恢痔厥獾姆肿有疟辏司哂蟹肿有疟晏赜械母叨忍匾针的特点,。实验设计了一条标记有荧光基团和猝灭基团的端粒酶引物的蝎型探针链,在退火条件下可以形成发夹信标状,荧光基团和猝灭基团靠近,没有荧光。当有目标物存在时,引物探针在端粒酶作用下进行扩增,其扩增序列能与发夹的环部杂交,于是发夹结构打开,荧光基团和猝灭基团分开,使得荧光恢复,进而实现对端粒酶活性的检测。该方法操作简单,特异性强,灵敏度高。关键词:电化学传感器;荧光生物传感器:端粒酶;纳米金;核酸外切酶:亚甲基蓝硕貉宦畚
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