文档介绍：细胞色素富钚苑治黾耙种苹硌芯研究生姓名段俊敏指导教师姓名、职称郭宾副教授学科专研究方分析化学色谱与药物分析向湖南师范大学学位评定委员会办公室二零一一年四月业分类号学校代码密级学号鱼塞垒А●●●·●
摘要肝脏细胞色素酶系负责人体%以上的药物代谢。因此,运用体外代谢反应体系绺挝⒘L获取肝药酶动力学参数以预测或外推药物在体内的生物转化行为,已成为当前新药研发中的一项重要内容。尤为关注的是幕硇悦鸹即自杀性抑制或联合用药时多个共存组分对代谢酶清除能力的相互抑制所导致药物不良反应的风险日趋增大。如何准确、快速地测定和表征药酶催化活性的动力学参数和抑制机理,对候选化合物的类药性筛选、体内清除和药物间相互作用的评估十分重要。然而,目前大多数的活分析方法都基于特征代谢产物的生成速率,并局限于单组分体系或简单抑制作用的测试与评价。传统方法不仅要求预先获得代谢产物标准品和较高的检测灵敏度,也不适合多组分或复杂药物相互作用体系针对现有富罘治龇椒ǖ木窒扌裕疚亩缘孜锵ú舛酶动力学参数的实用性进行了系统验证;建立了快速筛选中药复杂体系对人肝多酶体系抑制潜性的新方法;通过测定机理性抑制剂灭活参数推测了灭活作用的抑制机理。论文主要工作如下:诟咝б合嗌准际酰訡的特异性底物非那西丁和右美沙芬为探针,比较底物消耗法和传统产物生成法测定肝微粒体酶催化动力学参数值的差异,评价底物消的快速筛选。
除法测定微粒体酶药物代谢动力学参数的可行性;并进一步探究了产诹鞫⑸⒖装温孵、低温样品相分离、“蟣’’进样、多探针同时定量分析手段,建立了一种适用于复杂中草药对人体主要酶种同工酶探针反应钚缘囊种魄毙越锌焖偕秆∮敕掷嗟男路椒ā=徊椒现仅用两抑制剂浓度点测得的值与通常七浓度梯度获得的值相近,两点测试的重现性良好。结合两点测试程序减少样品数量,./方法成功用于种中药材粗提液对种酶抑制效应的快速筛选与分类。诟咝б合嗌准际酰捎梅悄俏鞫∥狢奶匾煨蕴针底物,、噻苯咪唑单独存在时的酶活性与动力学参数;蚄担⒂肓揭制剂同时存在时酶的动力学参数值进行比较,为推导灭活机理提供依据。关键词:细胞色素酶;酶动力学;底物消除;抑制剂;高效液相色谱;;机理性抑制生差异的原因,为合理使用底物消除法提供依据。Ⅱ
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录目第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯中药对酶活性的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯酶的抑制机理研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯论文的选题意义和主要研究内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章底物消除法测定微粒体酶动力学参数的实用性分析⋯⋯⋯引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯讨论第三章基于流动注射一质谱技术对酶抑制潜性的快速筛选⋯⋯⋯实验部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯活性测定方法进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.峁⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
第四章机理性灭活抑制剂对酶动力学参数的影响⋯⋯⋯⋯引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..湖南师范大学学位论文原创性声明⋯⋯⋯⋯⋯.:.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..实验部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。附