文档介绍：3,6二羟黄酮对HL60细胞生长增殖的影响
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:李春梅,刘新光,梁念慈
【摘要】目的观察3,6二羟黄酮对HL60细胞的影响。方法分别用台盼蓝拒染观察药物对细胞的毒性作用,流式细胞术、Hoechst 33258/PI荧光双染和琼脂糖凝胶电泳观察药物对细胞周期的影响以及凋亡情况。结果 3,6二羟黄酮对HL60细胞具有明显地细胞毒作用,呈一定的时效性;流式细胞术、荧光双染和琼脂糖凝胶电泳实验,发现了典型的凋亡细胞,且随药物浓度的增加,凋亡细胞数明显增加;然而统计学分析发现3,6二羟黄酮并没有引起HL60细胞周期的变化。结论 3,6二羟黄酮能明显地抑制HL60细胞的增殖,并能引起细胞的凋亡。
【关键词】 3,6二羟黄酮;HL60细胞株;凋亡
【Abstract】 Objective To observe effect of 3,6dihydroxyflavone on the proliferation of HL60 cell The effect of 3,6dihydroxyflavone on the proliferation of HL60 cell lines was detected by Trypan blue dye exclusion assay, the changes of the cell cycle was analyzed by flow cytometry (FCM), the apoptosis was analyzed by FCM, Hoechst 33258/PI fluore
scence staining and DNA agarose gel 3,6dihydroxyflavone had strong cytotoxicity to HL60 cell lines with dependence of time, While abnormality of cell cycles could not be induced. After treated with 3,6dihydroxyflavone for 36h, HL60 cell line could be induced apoptosis, which was confirmed by FCM,fluorescence staining and DNA agrose gel Conclusion 3,6dihydroxyflavone could strong inhibit the proliferation of HL60 cell lines and could induce apoptosis.

【Key words】 3,6dihydroxyflavone;HL60 cell lines;apoptosis

白血病是一种血液恶性肿瘤,白血病细胞丧失分化、成熟的能力以及异常增殖,致使恶性细胞在体内积累。白血病对人体有极大的危害,发病率较高,,白血病的治疗在当今世界上仍是一大难题。有关3,6二羟黄酮(化学结构见图1)与肿瘤细胞关系的报道很少,仅有学者研究了它对几种不同的细胞周期的影响[1],发现30 μmol/L 的3,6二羟黄酮能升高
SF295、SKOV3、HCT15、HCT15/CL02等多种癌细胞株S期细胞数。本实验首次在体外观察3,6二羟黄酮对人早幼粒白血病细胞株HL60生长增殖的影响,并探讨其抗肿瘤作用与细胞凋亡的关系。

图1 3,6二羟黄酮的化学结构(略)

材料与方法
3,6二羟黄酮购于美国Aldich公司;人早幼粒白血病细胞株HL60为广东医学院生化所保存;RPMI1640购于美国Gibco公司;新生小牛血清购于杭州西季青生物公司;PI、EB、RNase A、Hoechst 33258均购于美国 Sigma公司;其余为国产分析纯产品。

60培养于含有10%灭活的小牛血清、100U/ml青霉素和100 μg/ml链霉素的RPMI1640完全培养基中,37℃、5%CO2饱和湿度孵箱孵育,取对数生长期细胞实验。

,分装冻存,临用前用DMSO稀释成所需浓度。药物作用于细胞时,%(v/v),实验表明该浓度对细胞生长增殖无影响。