文档介绍：SU11248干预白血病细胞HL60对P27KIP1和cyclin G蛋白表达的影响
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:林东红, 韩燕燕, 陈惠瑜, 罗玲清, 胡建达
【摘要】目的: 探讨SU11248对人髓系白血病细胞株HL60的效应及其对HL60细胞表达P27KIP1和cyclin G蛋白改变的影响。方法: 应用MTT法检测SU11248对HL60细胞增殖能力的影响; 采用Western blot检测SU11248干预HL60细胞前后P27KIP1和cyclinG蛋白表达水平的变化及其相关性。结果: 不同浓度(、、、、 mg/L)SU11248作用HL60细胞24 h、 48 h、 72 h、 96 h后, SU11248可抑制HL60细胞增殖, 抑制作用呈现剂量和时间依赖性, 半数抑制浓度(IC50) mg/L。 mg/L SU11248作用HL60细胞72 h时抑制率达到最高。 mg/L SU11248作用HL60细胞后cyclinG蛋白表达呈时间依赖性降低, 而P27KIP1蛋白表达呈时间依赖性升高。两蛋白各时间组的改变与对照组相比差异均有统计学意义()。结论: SU11248具有抑制HL60细胞增殖的生物效应, 在HL60细胞及SU11248干预HL60细胞过程中, P27KIP1 基因可能对cyclinG基因及细胞周期发挥负性调控作用。SU11248通过上P27KIP1、下调cyclin G而干扰细胞周期可能是其发挥抑制肿瘤细胞分裂的环节之一。
【关键词】 SU11248; HL
60细胞; P27KIP1; cyclinG
造血细胞周期调控异常是白血病发生过程中最重要的事件之一。参与细胞周期调控的因子主要有细胞周期蛋白(cyclins)、细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclindependent kinases, CDK)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(cyclindependent kinases inhibitor, CKI)。在多种cyclin中, cyclinG在细胞周期家族中发现较晚, 其功能可能为在细胞周期调控和DNA修复中起作用, 并参与细胞凋亡过程。有资料报道[1], 在某些肿瘤中, cyclinG的过表达有促进细胞周期的作用, 可促进细胞增殖及癌细胞生长过程, 在肿瘤的生物靶向治疗方面有很好的应用前景。有研究初步发现cyclin G与急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病等恶性血液病有关[2]。
CKI的Kip家族包括p21、 p27、 p57。其中P27KIP1为新近发现的广谱的CKI, 能抑制大多数cyclinCDK的磷酸化激酶活性, 是细胞转录的负性调控因素, 在实验性肿瘤的发生发展过程中被证实是一种抑制癌基因[3]。其低表达或不表达与白血病患者病情进展及预后相关[4]。在白血病的研究中, 发现某些cyclin的表达与CKI的表达之间存在着正反馈机制[5], P27KIP1为广谱的CKI, 其与cyclin G 之间也可能存在互调控关系。
苹果酸舒尼替尼(sunitinib malate, Sutent, SU 11248)是一