文档介绍：CXCR4和MMP9在喉鳞癌中表达及关系
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
【关键词】喉鳞癌;趋化因子受体(CXCR)4;基质金属蛋白酶(MMP)9;免疫组织化学
喉鳞癌的发生发展是多因素、多阶段的复杂过程,涉及多个基因和多种分子水平变化。趋化因子受体(CXCR)4具有广泛生物学效应,在多种恶性肿瘤的进展中发挥重要作用〔1〕。基质金属蛋白酶(MMP)9是MMP家族中的重要成员,能有效分解基底膜成分、明胶及Ⅳ型胶原蛋白细胞外基质(ECM)的重要成分。本实验应用免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织CXCR4和MMP9的表达,探讨其关系及临床意义,旨在为研究喉鳞癌的发生发展中提供依据。
1 材料与方法
一般资料
我院2006年1月至2007年12月喉鳞癌切除后存档的蜡块,共110例,年龄34~73(±)岁。其中男性71例,女性39例,其中高分化51例,中分化34例,低分化25例。临床资料均完整,患者术前未接受放化疗。收集50癌旁正常喉黏膜作为对照组。
试剂及方法
实验用的鼠抗人CXCR4和MMP9单克隆抗体均购自北京中彬金桥生物技术有限公司。应用免疫组化方法进行检测,具体步骤:脱蜡,水化组织切片,3%H2O2去离子水孵育10 min,以阻断内源性过氧化物酶;抗原修复后分别滴加一抗,室温37度孵育1~2 h或过夜,PBS冲洗,5 min×3次;滴加生物素标记的二抗,室温37度孵育20 min,PBS冲洗,5 min×3次;滴加辣根酶标记链霉卵白素,室温37度孵育20~30 min,PBS冲洗,5 min×3次;应用DAB显色剂显色;自来水充分冲洗、复染、脱水、透明、封片。操作过程中严格质控。
判定标准
结果均由两位病理主治医师共同阅片得出。CXCR4和MMP9阳性细胞可见细胞质呈棕黄色颗粒沉着,每张切片观察10个具有代表性的视野,根据细胞质的染色强度和染色细胞百分率进行评分。染色强度:基本不染色为0分,染色淡者为1分,染色深者为2分。染色百分率:随机选取10个高倍视野,计算每个视野中阳性细胞的百分率:5%为0分,5%~25%为1分,26%~50%为2分,50%为3分。将每张切片的染色强度得分和染色细胞百分率得分相乘,为其最后得分。0~1分为阴性(),≥2分为阳性(+)。
统计学处理
应用SAS进行组间χ2检验。
2 结果
CXCR4和MMP
9在喉鳞癌与正常黏膜中的表达
在喉鳞癌中CXCR4和MMP9表达的阳性率明显高于正常黏膜(% vs %,χ2= 6, 1;% vs %,χ2= 5, 1)。
喉鳞癌中CXCR4和MMP9在不同病理特征的表达
喉鳞癌CXCR4和MMP9蛋白的表达与肿物大小、分化程度及淋巴结转移有关(),见表1。而与患者的年龄及性别等因素无相关性()。表1 CXCR4和MMP9阳性表达与喉鳞癌临床病理特征的关系〔n(略)〕
喉鳞癌中CXCR4和MMP9表达的关系
将喉鳞癌中CXCR4和MMP9蛋白表达