文档介绍：三、酶的分离技术
酶活力,也就是酶活性,是指酶催化一定化学反应的能力。(可以根据需要定义)
酶促反应速度,单位是:浓度/单位时间
酶促反应速度曲线:
酶溶液的制备
材料预处理与细胞破碎
胞外酶:盐析或者单宁沉淀、有机溶剂沉淀,制成酶泥
孢内酶:收集菌体,破碎细胞再提取
物理破碎法
通过温度、压力、声波等各种物理因素的作用,使组织细胞破碎的方法统称为物理破碎法。该方法多用于微生物细胞的破碎。
机械破碎法
高压法
爆破性减压阀
快速冻融法
机械破碎法
通过机械运动所产生的剪切力,使组织细胞破碎的方法称为机械破碎法。
机械捣碎法
研磨法
匀浆法
组织捣碎机
珠磨式组织研磨器
匀浆法
化学破碎法
应用各种化学试剂与细胞膜作用,使细胞膜的结构改变或破坏的方法。
:利用有机溶剂可使细胞膜的磷质结构破坏,从而改变细胞膜的透过性,再经提取可使膜结合酶或胞内酶等释放出胞外。
:表面活性剂可以和细胞膜中的磷脂及脂蛋白相互作用,使细胞膜结构破坏,增加膜的通透性。
:用溶菌酶专一性的分解菌体细胞壁的多糖分子,使细胞壁破坏,并在低渗透压的溶液中使细胞破裂。
:将细胞在一定的pH和适宜的温度条件下保温一段时间,通过细胞本身存在的酶系将细胞破坏,使胞内物质释放出来的方法。
2、酶的抽提
在一定的条件下,用适当的溶剂处理含酶原料,使酶充分溶解到溶剂中的过程,也称作酶的抽提。
主要方法