文档介绍：枸杞多糖对衰老小鼠肾小球形态学指标的影响
【摘要】目的探讨枸杞多糖(Lycium Barbarum harides,LBP)抗肾脏衰老的作用。方法建立小鼠衰老模型,以LBP连续灌胃6 w,采用光镜,透射电镜,组织化学方法对小鼠肾小球各项形态学指标进行定量分析。结果 LBP组肾小球形态,肾小球硬化率,肾小球平均细胞数,肾小球内微血管指标,肾小球基底膜厚度均较老年对照组有显著差异(P<<)。结论枸杞多糖具有较好的预防或延缓小鼠肾脏衰老的作用。
【关键词】枸杞多糖;抗衰老;肾小球;滤过屏障
枸杞属茄科植物,是一种价廉常用的中草药,具有滋补肝肾,益精明目及强身的功能。中医的一些长寿名方中都有其配伍,如龟龄集﹑格氏还少丹﹑八味丸等。枸杞多糖(Lycium Barbarum harides,LBP)是枸杞子的主要功能成分之一,具有多种药理作用和生物活性功能〔1〕。本文从形态学角度研究LBP对衰老小鼠肾小球的作用,为中草药的临床应用和推广提供理论依据。
1 材料与方法
实验动物及分组昆明种健康小白鼠60只,3月龄,体重(20±
5)g,雌雄各半。由佳木斯大学实验动物中心提供。小白鼠每日背部皮下注射D半乳糖,按每只小鼠100 mg/kg体重的剂量给药,连续6 w,形成糖代谢紊乱所致的亚急性衰老模型。随机分为3组,每组各20只。LBP组:每日在注射D半乳糖的同时给予LBP 100 mg·kg-1·d-1,用生理盐水稀释, ml/10 g灌胃连续6 w。 ml/10 g体重灌胃1次。
实验药品及设备 LBP由佳木斯大学药剂研究室从宁夏枸杞中分离提纯,%。D半乳糖为上海试剂二厂产品。Olympus生物显微镜(BH2型,日本),电镜1200EX(KCQⅠ型,上海),BI2000病理图像分析系统(成都)。
实验方法于最后1次灌胃后4 h断头处死动物,迅速取出双肾。光镜标本:常规石蜡切片3 μm厚。①HE染色,每个肾组织块随机取1张切片,观察肾小球,肾小管的形态变化,100倍视野下计数肾小体数目、硬化肾小体数并计算硬化肾小体的比例。400倍视野下每片选取20个最大肾小球,测量肾小体直径,肾小囊宽,计数肾小球平均细胞数。②PAS染色,更好地显示血管基底膜观察肾组织内微血管变化。400倍视野下随机选取20个肾小球,采用BI2000图像分析系统测定肾小球面积、毛细血管袢腔面积占丝球体面积的百分比及肾小管周毛细血管数。电镜标本:用JEM1200EX透射电镜观察。光学放大至20 000倍电镜照片测基底膜厚度,裂孔隙宽度和毛细血管内皮窗孔大小(每隔2 cm测一个数据)。
统计学处理数据以x±s表示,一般资料组间比较用秩和检验,硬化肾小体百分率用U检验,肾小球细胞数用Poisson分布检验。
2 结果
各组小鼠肾小体观察结果衰老模型组小鼠肾小体体积增大,局灶节段性肾小体硬化,灶状肾小管萎缩,间质纤维化,少量单核细胞浸润。衰老模型组肾小体与正常对照组相比体积增大,数量减少,硬化肾小体比例显著增加,肾小囊腔增宽,基底膜增厚且不均匀,足细胞裂孔隙变小,内皮窗孔增大。LBP组与衰老模型组肾小体形态和数量有明显差异(见