文档介绍：枸杞对D半乳糖致衰老小鼠学忆影响
【摘要】目的观察枸杞对D-半乳糖所致衰老小鼠学忆的影响。方法建立D-半乳糖致衰老小鼠模型,跳台实验检测其学忆能力,同时测定其大脑乙酰胆碱酯酶(AchE)活性,用黄嘌呤氧化酶法测定大脑超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥法测定大脑丙二醛(MDA)含量,观察小鼠服用枸杞汁后上述指标变化。结果与D-半乳糖模型组比较,各实验组均可提高小鼠的学忆能力(P<<),显著增加D-半乳糖所致衰老小鼠大脑SOD活性、降低MDA含量(P<<),可显著升高大脑AchE活性(P<,或P<)。结论枸杞能改善D-半乳糖所致衰老小鼠的学忆功能,其机制可能与枸杞的抗氧化自由基作用有关。
【关键词】枸杞
阿尔茨海默病(AD)是一种渐进性神经退行性疾病,其发病有增加的趋势〔1〕。枸杞(Fructus lycii)是我国传统的药材,它含有丰富的营养成分和药理活性成分。现代医学已证实,枸杞可调节免疫、延缓衰老和清除自由基等功能。本实验采用D半乳糖所致衰老小鼠模型,研究AD小鼠学忆能力、脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的变化及枸杞对这些指标的影响,并分析其作用机制,为临床应用提供理论依据。
1 材料与方法
11 试验动物及分组昆明小鼠雄性75只,体重(24g±2)g(包头医学院动物室)。随机分为5组,每组15只,即对照组,D-半乳糖模型组,低、中、高3个枸杞汁剂量组。饲养过程中对照组和模型组各死亡3只,枸杞汁剂量组各死亡2只。
12 药物与仪器枸杞(包头市奇力康医药公司)。D-半乳糖(上海源聚生物科技有限公司,批号030406)。AchE试剂盒、SOD试剂盒、MDA试剂盒(南京建成生物工程研究所)。752C紫外-可见分光光度计、721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)。STT-2型跳台仪(中国医科院药研所);德国来卡2135型切片机、加样器(上海伟业有限公司)。离心机(北京医用离心机厂);混匀器(上海伟业有限公司)。
13 D-半乳糖模型及给药方法除对照组给予生理盐水外,其他组每日均腹腔注射012g/(kgbw)的D半乳糖,给药体积10ml/(kgbw)。枸杞组同时灌胃给予高剂量(15g/ml)、中剂量(075g/ml)、低剂量(0375g/ml),对照组和模型组灌胃给予等容积的生理盐水,连续6周。枸杞汁制备:以枸杞子总体积的5倍量自来水冷浸3h,微沸1h×2次,合并滤液,文火浓缩制成,无菌条件下装瓶,置4℃冰箱备用。
14 方法
141 跳台实验造模后灌胃至4周后1h开始跳台实验[2]。
142 AchE、SOD、MDA的测定小鼠脑组织AchE活性用试剂盒方法;SOD活力采用黄嘌呤氧化酶法;MDA含量采用(TBA)法;脑组织蛋白质定量采用考马斯亮蓝(CBB-SDS)法。
15 统计分析采用SPSS100软件进行t检验。
2 结果
21 枸杞对小鼠跳台成绩的影响(表1) D半乳糖所致模型组,无论学忆成绩,与对照组比较,模型组小鼠的错误次数明显增多(P<001),学习成绩的反应期明显延长(P<001),记忆成绩的潜伏期明