文档介绍：生物传感方法研究小分子与蛋白相互作用分析的湖南大学硕士学位论文学校代号:学密级:学位申请人姓名:导师姓名及职称:培养单位:专业名称:论文提交日期:论文答辩日期:答辩委员会主席:号:
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日期:Ⅵ【年录埔蝗林啦作者签名:穿朱使日期:加年络嗳C芸冢谝荒杲饷芎笫视帽臼谌ㄊ椤南学学位论文原创性声明学位论文版权使用授权书湖大加『瓿г隆稳本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉保槐C芡拧作者签名:导师签名:日期:
摘要功能、结构以及与活性小分子作用模式的探针一一化学小分子探针,可以为重大蛋白质的相关信息一直是生命科学研究的重点,其中小分子与蛋白质的相互作用近年来引起了人们的研究兴趣。蛋白质的许多重要功能都有小分子的参与,研究小分子与蛋白质相互作用对促进生命科学的发展有着重要意义。利用化学小分子的多样性,选择适当的活性小分子,设计合成能够高选择性地探测蛋白质的疾病的诊断和防治提供新的标记物、新的药物作用靶点和新的先导结构,从而为创新药物的发现奠定基础。随着对生命科学的深入研究,发展能测定宽范围亲和力的小分子鞍字史椒ǔ晌I锘А⒁┪镓⒎⒓吧锎ǜ泄ぷ髡呙媪俚钠惹腥务。本研究论文针对当前测量小分子一蛋白质相互作用方法中的一些重点、难点问题展开讨论,其主要内容如下:兄屏艘恢只诘鞍捉岷系骺氐牧槊舳雀摺⑻匾煨郧俊⑼ㄓ枚群玫腄裂解分子机器,用于小分子与蛋白相互作用的分析。为此,我们设计了一条标记小分子的チ矗肓硪惶醭ざ壬猿さ腄单链杂交成异源双链,再与组装形成分子机器。如果输入一条吮昙怯ü饣和猝灭基团四甲基罗丹明挠ü馓秸耄ü馓秸牖嵊胍煸此吹某ち椿ゲ梗現J脊ぷ骷辞割探针,荧光基团与淬灭基团分离,荧光信号急剧增强;切割后的探针从长链上脱落,成为原来的分子机器,继续参与下一个反应。若小分子的结合蛋白存在,在荧光探针与长链互补之后,由于空间位阻作用,荒艿酱锴懈钗坏悖ü探针不会切开,荧光基团与淬灭基团的作用依然存在,不会出现荧光信号,从而达到对目标蛋白的检测。通过分子机器与荧光探针的配对、剪开、脱离、再配对这个循环,实现了对目标蛋白的循环放大检测。、、、,发现该方法特异性灵敏度高、特异性好、重现性强,有望成为一个通用的检测小分子与蛋白质相互作用的平台。章锌堂阜糯蠹际跤胙:焖睾怂崾侍寤Х⒐庀嘟岷希⒘。、血红素适配体的互补序列、分子内折叠区域三个部分的序列,当酆厦复笃魏蚫存在的条件时该序列不断被延伸、复制,切刻酶切割下游位点碱基,通过链置换反应,将血红素适配体置换掉,从而可以完成血红素适配体的循环复制。血红素一血红素适配体硕貉宦畚
复合物与鲁米诺一过氧化氢体系共存时,可发出强烈的化学发光信号。当有小分子结合蛋白存在时,由于小分子与其蛋白相互作用,使聚合酶和切刻酶的活性同时受到抑制,化学发光信号减弱,从而实现了对小分子结合蛋白的检测。该方法具有灵敏度高,选择性强,重现性好等优点,有望用于高通量蛋白一小分子相互作用的筛选和检测。章关键词:光学生物传感器;呀猓恍》肿樱坏鞍字剩幌嗷プ饔小分了‘鞍紫嗷プ饔梅治龅纳锎ǜ蟹椒ㄑ芯