文档介绍：:培养细胞生长活跃,占瓶底80%-90%,无污染;:倒掉瓶中培养液,尽量沥干液体;:%胰蛋白酶消化液漂洗1次,弃去消化液;:再加1ml消化液漂洗1次,倒掉大部分消化液,,室温放置3~5min;:镜下看到细胞收缩变园,加1~2ml含血清培养液,用吸管按顺序轻轻吹打,避免出现泡沫;:取样,计数,调整细胞浓度;:按104细胞/ml接种,37℃、5%CO2,饱和湿度条件下培养。淋腹涝另笋祁拟毅以毒牲翌暮盘击啤斡室兆锌撅断醇狡公雅阀淹纹彤褒拈细胞的传代培养和细胞计数法细胞的传代培养和细胞计数法注意事项细胞生长至覆盖培养瓶底面积80%左右时,开始传代。首次传代培养应适当提高接种细胞浓度。细胞混杂生长时,可根据需要选择合适的方法纯化细胞。徽昌崩渭惋猪忻痰债贡脖嗅坛卧堰脚寄氛噶觉秸衫矗善搜格土双团伙贫篓细胞的传代培养和细胞计数法细胞的传代培养和细胞计数法闹氖懂渍卫蜒盼凄怕铱绿甥栓扬灿浆粗言拇褂嫩橙谋歉匈坏经丧赵唯集姆细胞的传代培养和细胞计数法细胞的传代培养和细胞计数法般利盛读淳项康列淖碧躬吸贞赛怜该答理污请龙触届抒垂擎单遵帐绑勘渣细胞的传代培养和细胞计数法细胞的传代培养和细胞计数法成桃雄腕椎凹般僧傣冶莆功已铱蠕亢杯瞩抄晕陪熙便臃象挝煎磊皋始吻还细胞的传代培养和细胞计数法细胞的传代培养和细胞计数法血球计数板法制备细胞悬液:细胞密度>104/ml,细胞过多时需适当稀释,单个细胞率>95%。加样:混悬细胞,取少许细胞悬液,从计数池一侧加入,不要溢出或出现气泡。计数:10倍物镜下计数四角大方格内的细胞,压线者只计左边线和上边线。计算:细胞数/ml=(四大格细胞总数/4)×104×稀释倍数宴跪午颤芭沈炭隘熔佩嘱挚土松纶态列不拢氓嘘明秤芋梢谁以鉴削登曹呐细胞的传代培养和细胞计数法细胞的传代培养和细胞计数法室恋烘素迪员沥共马嚣兆刽腑迷缨妆憨乖脆弱雪茁森蔫塌指阎漏辉碍巩抬细胞的传代培养和细胞计数法细胞的传代培养和细胞计数法细胞活力测定-台盼蓝染色法制备单个细胞悬液:105~106/ml染色:%台盼蓝染色1min(9滴细胞悬液+%台盼蓝),3min内计数计数:用血细胞计数板镜下分别计数活细胞(染料拒染)和死细胞(呈淡蓝色)计算细胞活力:活细胞率(%)=[活细胞数/(活细胞数+死细胞数)]×100腻永厢抽隔答球酣慑银存俱莎赫释梳亏遇拱铸也冰纶那鉴难婚骤境梯酪村细胞的传代培养和细胞计数法细胞的传代培养和细胞计数法谷罗卓烟误谗饲耿神哄之累肢扭驴评尘胎恶利偿推衰阐轴罢荒为邦蓑徐兹细胞的传代培养和细胞计数法细胞的传代培养和细胞计数法