文档介绍：分16组,每组两人一、目的掌握盐析沉淀法提取鸡蛋卵清蛋白的提取和定量测定(考马斯亮蓝G-250)二、原理沉淀法也称溶解度法。其纯化生物大分子物质的基本原理是,根据各种物质的结构差异(如蛋白质分子表面疏水基团和亲水基团之间比例的差异)来改变溶液的某些性质,(如PH,极性离子强度,金属离子等),就能使抽提液中有效成分的溶解度发生变化。换句话说就是,不同物质置入相同的溶液,溶解度是不同的;相同的物质置入不同的溶液,溶解度也是不一样的。因此选择适当的溶液就能使欲分离的有效成分呈现最小溶解度,而使杂质呈现最小的溶解度,或者相反,有效成分呈现最小溶解度,而杂质呈现最大的溶解度,然后经过适当的处理,即可达到从抽提液中分离有效成分的目的。盐析法是根据蛋白质再稀盐溶液中,溶解度会随着盐浓度的增高而上升(盐溶),但当盐浓度增高到一定数值时,其溶解度又逐渐下降,直到蛋白质析出(盐析),盐析导致蛋白质分子表面电荷被中和,水化膜被破坏,最终引起蛋白质分子间相互聚集并从溶液析出。三、实验材料鸡蛋四、,,(边加边搅拌)静置10分钟,3000转每分钟离心10分,弃沉淀,取上清液。,至不能在溶解硫酸铵为止,,弃上清液,沉淀用5毫升生理盐水溶解(粗产品),-1之间。,数据处理。实验八、鸡蛋中卵清蛋白的提取和定量测定分16组,2人一组,所需仪器:大试管架16个带塞比色管16组×7支=128支比色皿6套×4个=24个722分光光度计6台1毫升移液管16×2支=32支2毫升移液管16×2支=32支5毫升移液管16×2支=32支10毫升带赛试管16×2支=32支钥匙6把吸管16支吸耳球16×2支=32个离心管16×2支=32支离心机4台所需要药品:(1)标准蛋白质溶液:(每组需6毫升)四个班配500毫升。%***化钠溶液500毫升。(2)考马斯亮蓝G-250染料试剂(每组需50毫升)配3000毫升棕色瓶保存称考马斯亮蓝G-,溶于95%乙醇溶液50ml,再加入85%磷酸(50g/L)100ml,用水稀释至1000ml,此溶液在室温下可放置1个月(3)%***化钠溶液(每组需8ml)配1000ml(4)硫酸铵饱和溶液(配500毫升)(5)硫酸铵固体(6瓶)趟霹抖盖履庭焊喧苇牲钱忽塑聋企萍反审酸惰代汽娘滤乃近喉秦份阂戏易惺姚洒骇煮臆羌筐洱联刨泵颧摔擂烛