文档介绍：中文摘要关键词:脂肪酶,固定化,酯化,有机溶剂,稳定性,动力学以月桂酸与月桂醇的酯化为模型反应,考查了固定化酶催化反应的影响因固定化脂肪酶催化有机介质中的反应是近年来酶工程领域的新技术。本文对来源于仍出幽的脂肪酶进行了固定化,优化了固定化的条件,研究了固定化酶的活性和稳定性以及催化酯化反应的动力学。采用吸附法,对八种树脂载体进行筛选,酶活实验结果表明,℃,最佳固定化时间为,载体:酶,即髦潭粉。素。结果表明,异辛烷为最适有机溶剂,最佳含水量为钣欧从ξ露任℃,在,反应时间小时,月桂酸的转化率达到%。考查了固定化酶的稳定性。结果表明,酶固定化后,热稳定性显著提高,在℃下,固定化酶的残余活性为%,而游离酶仅为%。固定化酶的重复利用性良好,在重复使用次后,=ü潭ɑ阜直鹪℃,℃,。路置天,%。卤4娼虾谩以异辛烷中月桂酸与月桂醇的酯化为模型反应,研究了固定化酶催化酯化反应的动力学。结果表明,。在最适条件下的动力学参数为:最大反应速率月桂酸和月桂醇的米氏常数。,、。,分别为.。..
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第一章文献综述固定化酶与游离酶相比,具有下列优剧:酶是一类由生物细胞产生的具有促化功能的蛋白质,作为一种生物催化剂,酶参与生物体内的各种代谢反应,而反应后其数量和性质不发生变化。同一般化学催化剂相比具有催化效率高、专一性强和反应条件温和等优点,已在食品、轻工、化工、医药、环保、能源和科研等各个领域得以广泛应用。虽然酶在生物体内能够催化许多化学反应,但用作工业催化剂仍存在缺陷。因为酶是由蛋白质组成,其高级结构对所处的环境十分敏感。一般情况下,对热,强酸,强碱,有机溶剂等均不稳定,在反应中容易失活。而且酶中常有杂蛋白及有色物质,造成产物分离提纯困难,限制了酶促反应的广泛应用。本世纪六十年代发展起来的酶固定化技术既克服了上述不足,又在一定程度一3至嗣柑赜械催化活性,从而成为生物技术中最为活跃的研究领域之一【俊酶的固定化,是用固体材料将酶束缚或限制于一定区域内,仍能进行其特有的催化反应,并可回收及重复使用的一类技术。大多数酶在固定化后稳定性增强,表现在对变性剂和抑制剂的抵抗力及热稳定性增加,从而减轻了对酶的破坏作用。。年蚐紫冉入拿浮⒌矸酆吞腔浮⑽傅鞍酌负秃颂酸酶等用重氮化聚氨基聚苯乙烯树脂进行固定,从世纪年代起,固定化酶的研究迅速发展,现在此项技术已由原来的单一固定化酶、固定化微生物细胞发展到动植物细胞、组织器官、微生物孢子【俊⑾赴朊浮】、好氧微生物细胞与厌氧微生物【康幕旌瞎潭ɑ潭ɑ缚芍馗词褂茫傅氖褂眯实玫教岣撸褂贸杀窘档停绕涫合使用贵重酶的情况;潭ɑ讣子敕从μ逑捣掷耄苫竦貌槐幻肝廴镜摹⒋慷冉细叩纳物,简化了提纯工艺,产率较高,产品质量较好;诙嗍榭鱿拢冈诠潭ɑ笪榷ㄐ缘玫浇洗筇岣撸山铣な奔涞厥褂储藏:潭ɑ妇哂幸欢ǖ幕登慷龋梢越涟杌蜃爸姆绞阶饔糜诘孜锶液,使反应过程能够管道化、连续化和自动化;傅拇呋从谈卓刂啤@纾笔褂锰畛涫椒从ζ魇保孜锊挥酶接触,即可使酶反应中止;天津大学硕士学位论文
,尽可能保护好酶蛋白的活性基团;.、物理吸附等方法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孑AА⒗胱咏换皇髦仍靥迳系墓潭ǚ绞健K亲钤绲拿腹潭ɑ椒ǎ世界上第一个工业化的固定化酶即是降陌被;热芤好父屎嫌诙嗝柑逑档氖褂茫唤隹衫枚嗝柑逑抵械男餍в使酶催化反应速度大大提高,而且还可以控制反应按一定顺序进行;腹潭ɑ透冈偕际酰构潭ɑ负湍芰吭偕际趸蜓趸乖体系合并使用,从而扩大其应用范围。固定化酶的应用目的、应用环境各不相同,而且可用于酶固定化制各的物理、化学手段、材料等多种多样。制备固定化酶要根据不同情况来选择不同的方法,但是无论如何选择,确定什么样的方法,都要遵循以下几个基本原则匦胱⒁馕置傅拇呋钚约白ㄒ恍浴C傅鞍追肿拥幕钚灾行氖敲傅拇化功能所必需的,酶蛋白分子的空问构象与酶活力密切相关,因此在酶的固定化过程中,必须注意酶活性中心的氨基酸残基不发生变化。而且要尽量避免那些可能导致酶蛋白高级结构破坏的条件,如高温、强酸、强碱、有机溶剂等处理酶。由于酶蛋白的高级结构是凭借氢键、疏水键和离子键等弱共价键维持,所以固定潭ɑΩ糜欣谏远⒘N4耍糜诠潭ɑ脑靥灞匦有一定的机械强度,不能因机械搅拌而破碎或脱落;潭ɑ赣τ凶钚〉目占湮蛔瑁】赡懿环腊赣氲孜锏慕咏蕴岣产品的产量;赣朐靥灞匦虢岷侠喂蹋佣构潭ɑ改芑厥沾⒉兀诜锤词褂茫潭ɑ赣τ凶畲蟮奈榷ㄐ裕≡靥宀挥敕衔铩⒉锘蚍从σ悍⑸学反应:潭ɑ赋杀疽5停