文档介绍：液基细胞学标本制片、染色及诊断技术的质量控制
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:漆明,蒋庆军,韦海春,颜元秀,蒋瑜采
【关键词】细胞学技术组织细胞学制备技术质量控制
近年来随着对提高宫颈癌筛查质量和扩大筛查人群的关注,细胞学新技术发展迅速,液基细胞学制片技术(ThinPrep TCT)及TBS[1]诊断报告方式的出现使浸润性宫颈癌发病率较过去明显降低,但TCT的假阴性、假阳性诊断仍然客观存在,而搞好质量控制是有效降低TCT假阳性和假阴性的前提。笔者从标本制片、染色及诊断等方面介绍如何搞好TCT的质量控制。
1 标本制片
标本采集
标本采集的效果明显地影响诊断的准确性,因此标本采集必须取到足够量的细胞数,并且各类标本中应出现有效细胞成分。涂片内可供诊断的细胞太少或红细胞太多等因素均可造成假阴性结果。标本采集应在直观下进行,应采集到病变部位和宫颈的移行区(鳞柱交界区)细胞,该区是绝大多数宫颈癌起源的部位。TCT标本取样要保证宫颈刷的尖端部位有一定的压力,宫颈刷的尖端放入宫颈内,两边紧贴颈管的外口,以取得足够的细胞成分。涂片中除鳞状上皮细胞外,必须见到柱状上皮细胞或化生的鳞状上皮细胞。另外,标本采集时,应尽量避免干扰物(如血液、黏液等)混入。取材应避开月经期,取材前24h不上药,不冲洗,不过性生活。分泌物较多的时候可在取材前用棉签轻轻沾去,不可用力擦。
标本制备
TCT制片时细胞标本经程序化处理,使黏液、血细胞和炎性细胞与上皮细胞分离,制片薄且分布均匀。一般取材满意的标本均能制出质量较佳的细胞学涂片,但不同原理TCT制片也各存在某些缺点,如膜式法细胞分布不均,涂片中某些区域细胞缺如;沉淀法细胞多的标本制片细胞层次太多,不同一平面上,细胞数量少的标本同样沉淀时间制片可造成细胞片的数量太少。因此,TCT制片也应根据所用的原理方法认真控制好容易产生制片质量不佳的情况。
标本固定
无论是传统的的巴氏涂片或TCT制片,制片完毕应立即放入固定液内,使细胞形态保存完好,避免涂片完全干燥造成细胞褪变,固定不佳会立即引起细胞退化,可导致假阴性或假阳性。TCT的细胞保存液是一种良好的防腐剂,对细胞有一定的固定作用,但仍未达到良好的固定效果,在制成薄层细胞片后,必须用标准浓度的细胞固定液固定。细胞固定液通常采用95%乙醇,乙醇固定液较好的固定浓度为90%~95%,低于90%的乙醇固定效果不好,95%以上浓度乙醇固定可造成细胞核深染。固定时应淹没整张细胞片。固定液还必须保持新鲜,使用过的固定液再使用前应过滤并添加新的固定液,保持其有效浓度。
标本染色
宫颈细胞学的常规染色方法有巴氏染色法和苏木素—伊红染色法等[2],较理想的染色方法为巴氏染色及其改良染色方法。巴氏染色包括细胞核染色分化→返蓝→细胞质染色→透明等步骤,其中最重要的环节是苏木素的细胞核染色。
染色结果
上皮细胞:核紫蓝色,核仁红色;胞质角化细胞呈粉红色,全角化呈橙黄色,角化前细胞呈淡蓝色或淡绿色;白细胞:核蓝紫色,胞质淡蓝或淡绿色;红细胞鲜红色或橙红色;黏液淡蓝或粉红色。
染色失败的补救
巴氏染色时如遇到染色质量不佳或涂片长期存放而褪色时,可