文档介绍：微生物实验室守则微生物学实验课是一门操作技能较强的课程。为保证实验顺利进行和实验操作者的安全,培养学生独立分析问题和解决问题的能力,达到训练学生掌握基本操作技能、验证理论知识的目的,所有参加实验的老师和学生都应严格遵守以下实验守则。1、 每次试验前必须充分预****实****指导,了解实验的目的、原理和方法。初步熟悉实验操作中的主要步骤和环节,对整个实验的安排做到先后有序、有条不紊和避免差错。2、 为保证实验台面的整洁和实验顺利进行,非本实验必需的物品(包括帽子围巾等)请放在指定地方,不影响实验操作。3、 实验室内严禁吸烟,进食、饮水,也不可将零食等带入室内。4、 进入实验室应穿工作服,离开时脱去,并经常洗涤保持清洁。5、 实验进行时,应尽量避免在实验室内走动,减少尘土飞扬。禁止高声谈话,保持室内安静。6、 实验时要细心谨慎,严格按操作规程进行,凡需进行培养的材料都应注明菌名、接种日期及操作者姓名(或组别),放在指定的温箱中进行培养,并在规定时间内认真进行结果观察,以实事求是的科学态度做好实验记录,并及时提交实验报告。7、 节约药品、器材和水电。各种仪器应按要求操作,用毕按原样放置妥当。实验完毕后,整理和擦净台面。离开实验室之前关闭水、电、门窗等,并用肥皂洗手。实验一玻璃器皿的准备及常用仪器的使用[目的]系统掌握玻璃器皿的准备方法及常用仪器的使用。[原理]使用无害处理灭菌洗涤包扎一、 玻璃器皿的无害处理:1、 新购置的玻璃器皿因含有游离碱,一般在2%的盐酸溶液中浸泡数小时后再用清水洗净,也可在洗衣粉水中煮30-60min,取出用清水洗净。2、 常用玻璃器皿洗涤时可用鬃刷蘸取洗衣粉刷洗,然后用自来水冲洗干净。3、 带油污玻璃器皿先将倒空的玻璃器皿用10%的氢氧化钠浸泡半小时或放在5%的苏打液内煮两次,去掉油污,再用洗衣粉和热水刷洗。4、 带菌玻璃器皿经121°C高压蒸汽灭菌20min后,趁热倒去内容物,再用洗衣粉水刷洗干净,以水在内壁均匀分布成一薄层而不出现水珠为油垢除尽的标准。经以上处理的玻璃器皿,可满足一般实验用。少数实验对玻璃器皿清洁度要求较高,除用上述方法外,还应先用2%的HC1溶液浸泡数lOmin,再用自来水冲洗,蒸馅水淋洗2-3次。有的尚需超纯水淋洗然后烘干备用。二、 玻璃器皿的包扎:吸管、平皿、瓶口等的包扎三、 玻璃器皿的灭菌:分为两种,高压蒸汽灭菌法和干热灭菌法。高压蒸汽灭菌法是湿热灭菌中应用最为广泛的一种方法。其原理是依据在一个密闭的高压蒸汽灭菌器中,水的沸点随水蒸汽压的增加而上升,加压是为了提高水蒸汽的温度。把待灭菌物品放在灭菌器内,,温度可达到121°C,—般维持20min,即可杀死一切微生物的营养体及其葩子。一般的培养基、玻璃器皿、金属用具、实验服、传染性标本等均可用这种方法有效灭菌。灭菌的温度及时间视灭菌物品中的微生物种类及数量而定。干热灭菌法也叫热空气灭菌法。实验室通常使用恒温控制的电热鼓风干燥箱作为干热灭菌器。此法常用于空的玻璃器皿、金属器具和其他耐高温的物品(如陶瓷培养皿盖、石蜡油、碳酸钙)的灭菌。其优点是灭菌器皿保持干燥。但带有胶皮、塑料的物品、液体及固体培养基不能用此法。干热灭菌一般以能否杀死细菌的芽胞作为彻底灭菌的标准,160-170°C,2-3h方可杀死细菌的芽胞。[实验材料]吸管若干、平皿5付、盐水瓶1个、中试管、小试管、脱脂棉、纱布等[实验内容]一、 各种玻璃器皿的包扎二、 棉塞的制作视管口大小取脱脂棉若干,顺纤维方向层叠,用力卷紧后用纱布包扎,以套入视管口1/2为宜。三、各种常用仪器的使用方法及注意事项1、高压蒸汽灭菌器操作方法:加水:打开灭菌锅盖,加水适量(手提式高压锅加水到与支架圈平行处)装料:将带灭菌物品放于灭菌桶内,物品排放注意彼此间留有一定空隙,使蒸汽在容器内能够流通达到每个物品的部位,以免形成蒸汽死角。物品不要紧靠桶壁,防止冷凝水进入灭菌物品。密封:将盖上的软管插入灭菌桶的槽内,使罐内冷空气自下而上排出,加盖,上下螺栓口对齐,釆用对角方式均匀旋转拧紧螺栓,使灭菌锅密闭。加热:打开排气口(放气阀),排气5-1Omin后(或喷出气体不形成水雾),此时蒸汽已将锅内的冷空气排尽,关闭放气阀。温度随蒸汽压力增高而上升。待压力逐渐上升至所需温度时,控制热源,维持所需压力和温度,并开始计时。到达规定时间,关闭热源,停止加热,压力随之逐渐降低。降压、取料:待压力自然降至“0”后,打开放气阀,松动螺栓,开盖。立即取出灭菌物品,以免凝结在锅盖和器壁上的水滴弄湿包装纸或被灭菌物品,增加染均的概率。斜面培养基自锅内取出后要趁热摆放,灭菌后的空培养皿、试管等要烘干或晾干。清理:灭菌完毕后,除去锅内剩余水,保持锅内干燥。若连续使用则需每次补足水分。注意事项:高压蒸汽灭菌的技术关键是