水稻OsPDIL1-1 基因的功能初步分析.doc

文档介绍：
水稻 OsPDIL1-1 基因的功能初步分析
韩小花,陈红,江玲,王益华,郭洪年**
(南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,南京市,210095)
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摘要:蛋白质二硫键异构酶(Protein Disulfide Isomerase,PDI)在衣藻及动物中研究较为详
细,除人源典型结构 PDI 和人源胰腺 PDI 外,Rb60、ERp57 和 ERp72 在植物体中都有相似
结构的蛋白。本研究通过图位克隆的方法在水稻中分离了一个水稻中控制淀粉合成的基因
Protein Disulfide Isomerase Like 1-1 (OsPDIL1-1)。转基因互补结果进一步证实了图位克隆的
结果。RT-PCR 和 western 杂交结果显示 PDIL1-1 在水稻根、茎、叶、叶鞘、穗和不同发育
时期的胚乳均有表达,在发育 12 天的胚乳中表达量最高,而突变体中则没有检测到 PDIL1-1
的表达。体外实验证实 PDIL1-1 蛋白具有还原酶活性及分子伴侣活性。荧光定量 RT-PCR
检测发现内质网胁迫相关基因的表达均被显著上调,同时 PCD 标志基因 HSR203J 在 T3612
中被诱导表达。因此 PDIL1-1 的缺失导致胚乳细胞发生严重的内质网胁迫,并极有可能启动
PCD,最终影响淀粉的合成。
关键词:水稻;粉质;内质网胁迫;蛋白质二硫键异构酶;功能分析
中图分类号:S511
Preliminary research on the function of OsPDIL1-1 in
rice(Oryza sativa L.)
HAN Xiaohua, CHEN Hong, JIANG Ling, WANG Yihua, GUO Hongnian
(Nanjing Agricultural University, National Laboratry of Crop ics and Germplasm
Enhancement, Nanjing City, 210095)
Abstract: Protein disulfide isomerase (PDI) study in more clear in Chlamydomonas and animals,
Rb60, ERp57 and ERp72 in plants have a similar structure proteins except the typical structure of
anthropogenic PDI and the anthropogenic pancreas PDI. This study separated a control rice starch
synthesis genes Protein Disulfide Isomerase Like 1-1 (OsPDIL1-1) in rice by using the method of
map-based cloning. Semi-quantitative RT-PCR and western blot showed PDIL1-1 in rice roots,
stems,