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泶锒愿伟┫赴鸋侵袭及迁移能力的影响·论著·鰎恍鞍芽谪帷甏琇洳以霵说竹鏩蚷∞觟螂叻,劬删妒卵£所砌£甜觚印纽珸衝等芯糠⑾謓盯在肝癌、宫颈癌、卵巢癌等肿瘤咖一少,,商雪莹滥心琇洳行剑緄船锄重危害人类健康的恶性肿瘤,其发生与发展是一个多员,被发现在肝癌等恶性肿瘤中表达增高,而被认为在肝癌的发生发展中起着重要作用,但具体作用机制还不是很清楚。此ǚ核兀个氨基酸残基组成,属于泛素蛋白家族中的泛素样修饰蛋白闪礁龇核匮糠智昂笕诤转导、蛋白易位、细胞凋亡和细胞周期调控。弧组织中表达上调,提示谥琢龇⑸⒄怪衅鹱重要的作用。魑猅~盏贾琢龇⑸重要的下游基因,有可能参与炎症相关性肿瘤的发展因的伟┫赴辏鄄霧过表达对赴窒R频挠跋欤⒔谢虮泶锲追高一鳷的赴蠪蛋白均过表达;Ⅳ汀过表达能明显提高赴那窒扒ㄒ颇芰Α—嘲拶锄洌琔鳓纊阰叫,∞肪蚴姗,原发性肝癌琀茄步骤、多基因的参与过程。魑@喾核丶易宄肿恿而成㈦!参与各种细胞发展过程,包括信号进程。肝癌是一种与炎症密切相关的恶性肿瘤,锌赡艹晌8伟┰し雷饔冒械悖杂贔功能的深入研究,将对于慢性炎症所致肿瘤的防治具有重要意义。本研究中,通过建立稳定转染摘要:目的探讨泶锒愿伟┫赴鸋侵袭及迁移的影响。方法采用脂质体转染法建立基因过表达的显细胞株;采用蛋白质印迹法检测转染重组表达载体一螅琀细胞中鞍的表达水平。体外侵袭实验及划痕实验检测蚬泶锒訦细胞迁移及侵袭能力的改变,并采用芯片检测掠斡胂赴窒R葡喙鼗虻牟钜毂泶铩结果蛋白质印迹法检测结果显示,,并促进肝癌的发生及发展。关键词:桓伟籋;侵袭;转移认:,薄实用预防医学年第卷第文章编号:中图分类号:.文献标识码:£.鳷一,畂啪籋;籌基金项目:国家自然科学基金项目作者单位:泄娇拼笱Ц绞舻谝灰皆耗诜置谘芯克赡∧诜置诩病重点实验室赡蜓泄娇拼笱Ц绞羰⒕┮皆神经外科作者简介:高芸,女,天津市人,博士,副教授,主要从事肿瘤分子生物学研究工作。,琕叭—竔—籵猠.—獁瑀既甌订—甌一篎;叭,....
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■醑茹鞠簟嘲簟嘲—罔—问豳州◇.√◇鳰培养基、胎牛血清、、—体外侵袭性实验各组细胞用鳰培养液肝癌细胞株蚿籲盯质粒由新加分别将泶镌靥寤蚩瞻妆泶镌其中籄、被转染了泶镌靥澹琕白对照组和阴性对照组相比较,过表达组可见蚬泶锒訦细胞的体外迁移一一盯一的平均迁移距离明显高于龆哉兆,提示泶转染细胞后,在豥的中高表达,而空白对照组和阴性对照组均未见有Ⅳ汀购自荆琑赴呀液购自北京百泰克生物科技公司,鼠抗人タ隆抗体购自公司,兔抗鼠固骞鹤公司,侵袭室试剂盒购自公司。人淌谠搿细胞培养、转染及筛选将对数生长期的细胞接种于軱培养板待细胞融合度为%左右,用—行聚丙烯酰胺凝胶电泳,半干转至ぃ%脱脂邮罂谷刷敉タ梗℃过夜后,再加∈偷腍标记的兔抗鼠二抗室温孵育璓逑次,⒐庀杂啊划痕实验检测细胞迁移能力在着嘌灞板为宜。第莑枪头垂直于培养板,在细胞表面划直线。用逑聪赴次,弃去被刮除的细胞,加入无血清培养液,置于℃、寤质サ谋ズ褪6扰嘌渲信嘌S比⊙恼眨光学显微镜下随机选取鍪右埃饬肯赴ㄒ凭嗬耄袭室的上层,每组龈纯住<绦嘌的小室,去除基质膜上未侵袭转移细胞,以—试剂盒染色穿膜细胞后在断晕⒕迪计数穿膜细胞数。基因芯片技术进行基因表达差异性法擅拦鶤提供瑼』砑型枷实验数据采用软件分析