ASIC1a开放诱导大鼠关节软骨细胞基质代谢失衡的作用及机制研究.doc

文档介绍：
ASIC1a 开放诱导大鼠关节软骨细胞基质
代谢失衡的作用及机制研究#
唐杰1,胡伟2,吴繁荣1,葛金芳1,陈飞虎1*
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(1. 安徽医科大学药学院,合肥 230032;
2. 安徽医科大学第二附属医院,合肥 230032)
摘要:目的:研究 ASIC1a 开放对胞外酸化诱导的 AA 大鼠关节软骨细胞代谢失衡的作用及
部分机制。方法:实验分正常组(pH )、pH 、特异性阻断剂 PcTX-1、沉默组、非特
异性阻断剂 Amiloride 处理的酸化组,对二甲基亚甲蓝分光法检测大鼠关节软骨细胞培养上
清中 GAG 的含量,氯胺 T 法检测 HYP 的含量,ELISA 法检测 MMP-2、TIMP-2 的含量。
Western blot 法检测酸化及阻断 ASIC1a 后 ERK1/2、p38MAPK 磷酸化蛋白的表达。结果:
阻断酸敏感离子通道后,能明显抑制胞外酸化引起的 GAG、HYP 和 TIMP-2 的水平降低
(p<),对 MMP-2 的水平降低抑制作用较弱(p<)。酸刺激能引起 ERK1/2、p38MAPK
磷酸化水平升高,阻断酸敏感离子通道后磷酸化水平升高受到抑制(p<)。结论:ASIC1a
参与了酸诱导的大鼠关节软骨细胞基质代谢的失衡,并且激活 ERK1/2 和 p38MAPK 信号通
路,阻断 ASIC1a 能抑制基质代谢的失衡,减少 AA 大鼠关节软骨的损伤。
关键词:酸敏感离子通道 1a;类风湿关节炎 2;关节软骨细胞;基质代谢;丝裂原激活的蛋
白激酶
中图分类号:
ASIC1a contributes to the matrix metabolism imbalance
of articular chondrocytes induced by extracellular acidosis
TANG Jie1, HU Wei2, WU Fanrong1, GE Jinfang1, CHEN Feihu1
(1. School of Pharmacy,Anhui Medical University,Hefei,Anhui 230032;
2. The Second Hospital of Anhui Medical University, Hefei Anhui230601)
Abstract: AIM To study the effect of blocking ASIC1a on the cell metabolism of the rats articular
chondrocytes with extracellular acidosis and its possible molecular mechanism. METHODS Establish
and identify the ASIC1a-silencing model. The GAG content of cell culture supernatant was determined
by dimethyl-methylene blue spectrophotometric assay, while HYP co