文档介绍：学位论文原创性声明㈣㈣㈣㈣㈣Y2547156本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:荔I彰吼勿仔年歹月呷日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者:¨月丫日摘要他莫昔芬耐药乳腺癌细胞的干细胞特性研究博士研究生:刘慧导师:樊青霞教授摘要雌激素能够与乳腺组织的雌激素受体(estrogenreceptor,ER)结合从而促进乳腺组织的生长,由于这一功能,雌激素具有促进乳腺癌发生发展的作用。研究表明,大部分的乳腺癌组织表达ER,所以阻断ER的转导通路是治疗各期乳腺癌的一个安全且有效的方法,这就是乳腺癌的内分泌治疗。1986年Beatson采用双侧卵巢切除术治疗乳腺癌患者并且取得了良好的疗效,这是内分泌治疗方法的开始。近三十年来,ER拮抗剂他莫昔芬已经成为了乳腺癌内分泌治疗中最常见的治疗药物。但是随之产生的问题是乳腺癌对他莫昔芬的耐药性。研究表明,大约有三分之一的乳腺癌患者对内分泌治疗不敏感,而且部分最初对他莫昔芬敏感的乳腺癌患者,最终会产生对他莫昔芬的耐药从而导致乳腺癌的复发转移。尽管有大量的研究对这一现象进行了探讨,但是其机制却并不完全清楚。目前认为乳腺癌对他莫昔芬产生耐药的机制主要有以下几点:ER的改变,增强的生长因子通路,核受体共调节因子,对雌激素的超敏感,药物的代谢变化等。此外,还有研究表明,肿瘤干细胞(cancerstemcells,CSCs)有可能在乳腺癌的获得性耐药中发挥了重要的作用。CSCs是肿瘤组织所包含的一小群具有自我更新能力和分化能力的细胞,由于CSCs的这种能力,CSCs被认为是产生肿瘤组织的细胞。研究发现,乳腺癌CSCs(breastCSCs,BCSCs)具有对放疗和化疗耐药的特性,也因此对乳腺癌的发生发展起着重要的作用,但是BcSCs在乳腺癌对他莫昔芬耐药中的作用并不明确。到目前为止相关的研究很少,但是我们推测BCSCs有可能参与了乳腺癌对他莫昔芬的耐药作用,主要依据有以下两点:在乳腺癌对他莫昔芬的耐药过程中,上皮间质转化(,EMT)起了重要的作用;EMT和CSCs密切相关,被认为是CSCs的特性之一。摘要EMT是上皮细胞向间充质细胞转化的过程,起初在胚胎干细胞中发现。EMT过程中,上皮细胞之间的连接消失,细胞的运动性增加,从而导致肿瘤的生长和转移。研究表明,在乳腺癌细胞系MCF7对他莫昔芬产生耐药的过程中,乳腺癌细胞的侵袭性和运动能力增加,并且伴随着EMT的发生:问充质样细胞的形态改变,,。EMT和CSCs之间的关系也得到了证明。对人乳腺上皮细胞系的研究表明,采用Twist和Snail诱导EMT以后,乳腺细胞表达了干细胞的标记物并且表现出微球体形成能力的增加。此外,Brcal基因缺陷小鼠分离的乳腺癌细胞呈现出EMT特点并且表达了CSCs的标记物。将上述这些研究结果结合起来,我们认为CSCs很有可能参与了乳腺癌细胞对他莫昔芬获得性耐药的机制。为了验证上述推测,本研究建立了对他莫昔芬耐药的乳腺癌上皮细胞系MCF7,并观察了其是否具有CSCs的特性。(,)的MCF7细胞,时间持续8个月,。,观察诱导过程中细胞形态的变化。—RMCF7细胞的增殖能力和倍增时间。',测定耐药指数。,,进一步确定TAM—RMCF7对他莫昔芬的敏感性。,细胞体积变小。(wildtype,WT)细胞相比,口蝴一RMCF7细