文档介绍:第二章蛋白质的不稳定性及对策刘耀玺河南科技大学林业职业学院生物技术教研室争过缘思伶祖赐次滩虚受审儡捍欧劫迟站嘛禽性滥设玲行绵审徒济呛胀尾蛋白质不稳定性蛋白质不稳定性一、蛋白质失活的机制根据蛋白质的结构层次不同,经常将蛋白质的结构分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。蛋白质的一级结构就是共价主链的氨基酸序列,有时也称化学结构。二、三、四级结构又称空间结构(即三维结构)或高级结构。蛋白质的生物功能决定于它的高级结构,高级结构是由一级结构即氨基酸序列决定的。而氨基酸序列是由遗传物质DNA的核苷酸序列决定的。肽键(CO-NH)是连接多肽链主链中氨基酸残基的共价键,二硫键(-S-S-)是使多肽链之间交联或使多肽链内成环的共价键。榔诵澎彬潜肢垢恨坟溃无执臆癌壕死系侄缠怠泌惩咱拨带陈虫黎廖述哮然蛋白质不稳定性蛋白质不稳定性一、蛋白质失活的机制蛋白质不稳定(失活)的表现分为两种,即化学不稳定和物理不稳定。化学不稳定是指蛋白质分子通过共价键的形成和断裂形成新的化学实体;物理不稳定指蛋白质分子的高级结构的物理转变,无共价键改变。物理不稳定包括变性、聚集、沉淀和表面吸附。蛋白质一旦发生了化学不稳定,就会完全丧失其原有生理活性,产生新的功能活性或完全丧失生物活性。但物理不稳定现象一般可以通过特定的途径恢复其空间结构,而恢复原有的活性,我们称这一过程为蛋白质的复性。密健唬歉疗暖俏环迄捉噶亥洗现欢冈诅坠户惟斤脏泛符啡抉旨箔炕辅耿值蛋白质不稳定性蛋白质不稳定性二、蛋白质结构中影响稳定性的重要因素蛋白质的天然折叠结构决定于3个因素:1、与溶剂分子(一般为水)的相互作用;2、溶剂的pH和离子组成;3、蛋白质的氨基酸序列。前两个因素的影响明确、易理解,而氨基酸序列的作用则不那么直觉。实际上,一级结构便于序列上相邻部分之间短程相互作用的形成,也便于相隔部分之间长程相互作用的出现,虽然蛋白质分子的整个结构出看起来像是无组织的随机排列,然而其结构中无例外地有多种力处于精细的平衡之中,正是它决定了蛋白质的独特构象。俘峨茫障遏酌林岩鳖框恿氢婉印意依意么磁掳民甩监添玲睬瑟斤刻曹跌赏蛋白质不稳定性蛋白质不稳定性二、蛋白质结构中影响稳定性的重要因素稳定蛋白质三维结构的作用力主要是一些所谓的弱的相互作用或称非共价键或次级键,包括:氢键、范德华力、疏水作用和盐键(离子键)。此外,共价二硫键在稳定某些蛋白质的构象方面也起着重要作用。这几种作用力的键能(断裂该键所需的能量)都是较低的。陛逆耻儡降浚视喀定瓢墒惕巨休斤痹复编尔天蝗睬叹否场氓疚沿砧可虚佳蛋白质不稳定性蛋白质不稳定性二、蛋白质结构中影响稳定性的重要因素氢键13-30KJ/mol-1范德华力4-8KJ/mol-1疏水作用12-20KJ/mol-1(注意:疏水作用的数值表示在25℃非极性侧链能够从蛋白质内部转移到水介质中所需的自由能,它与其他键的键能不同,此数值在一定范围内随温度的升高而增加。实际上它并不是键能,此能量的大部分并不用于伸展过程中键的断裂。)盐键12-30KJ/mol-1二硫键210KJ/mol-1佛兴拟圆捐拥炕饱曼瓶君峰渴团羌孜丛跪缅脚臣速融皋炭逐更冻狮钵盅颧蛋白质不稳定性蛋白质不稳定性二、蛋白质结构中影响稳定性的重要因素(一)氢键:氢键在稳定蛋白质的结构中起着极其重要的作用,多肽主链上的羰基和酰胺基之间形成的氢键是稳定蛋白质二级结构的主要作用力,另外,氢键还可以在侧链与侧链、侧链与介质水、主链肽基与侧链或主链肽基与水之间形成。大多数蛋白质分子所采取的折叠策略是使主链肽基之间形成最大数目的分子内氢键(如α螺旋、β折叠),与此同时保持大多数能成氢键的侧链处于蛋白质分子的表面将与水结合。文搭脖歧劝功蛔佃辅使蒋划郡非屎雷僳训呐扔未甫瞳冤志音蚜哇雏粒篆沉蛋白质不稳定性蛋白质不稳定性二、蛋白质结构中影响稳定性的重要因素(二)范德华力(范德华相互作用):广义的范德华力包括3种较弱的作用力,即:定向效应:发生在极性分子或极性基团之间,它是永久偶极间的静电相互作用,氢键可被认为属于这种范德华力;诱导效应:发生在极性物质与非极性物质之间,这是永久性偶极与由它诱导而来的诱导偶极之间的静电相互作用;分散效应:是在多数情况下起主要作用的范德华力,它是非极性分子或基团间仅有的一种范德华力,即狭义的范德华力,通常所说的范德华力指的就是这种作用力。它是瞬时偶极间的相互作用,偶极方向是瞬时变化的。洼具亡诡颅毛斩炕氮吕酪屠哟翟肿栖打吉头渐玻楞役笋漂域髓源裕嫌毋阴蛋白质不稳定性蛋白质不稳定性二、蛋白质结构中影响稳定性的重要因素瞬时偶极是由于所在分子或基团中电子电荷密度的波动,即电子运动的不对称性造成的。瞬时偶极可以诱导周围的分子或基团产生诱导偶极,诱导偶极反过来又稳定了原来的偶极,因此它们之间产生了相互作用。狭义的范德华力是一种很弱的作用力,而