文档介绍：《生物技术类大实验》实验指导书2009年9月1日前言《生物技术大实验》是为生物技术专业本科高年级学生开设的综合实验课程,是在普通生物学实验、生物化学实验、微生物实验、细胞生物学和遗传学实验的基础上的综合实验课程。该实验课程偏重于分子生物学实验教学,通过此实验课程,学生不仅学****到最基本的分子生物学技术,而且学****到前沿的生物技术。分子生物学实验技术突飞猛进,日新月异。分子生物学技术的广泛应用,在20世纪下半叶对生命科学的进步产生了举世公认的巨大推动作用,而且对人们的生活和整个社会的发展亦产生了巨大的冲击和影响。分子生物学技术已广泛渗透和应用到生物学、遗传学、细胞学、微生物学、进化学、肿瘤学、免疫学、药理学、发育学、病毒学、神经生物学、生药学、法医学等与基础医学和临床医学有关的研究领域。21世纪将更是分子生物学技术快速发展的时期,由此引起的生物技术革命并将更加深刻地影响社会的发展。学生基本技能和动手能力的培养都离不开实验室,离不开实验课上的训练,很多理论上的原理都需要到实验课上去验证,很多理论上的知识都需要到实验课上去实践。而实验课教材或实验指导书是开好实验课的基本条件之一。虽然目前的分子生物学实验教材版本众多,但针对本科生的生物技术大实验教材尚无出版。为了加强本学科的教材建设,促进本学科实验课的开设,我们参考了国内外最新的有关分子生物学实验技术的专著,根据我校学生的特点及我们自己现有的基础和条件,特选择了部分实验内容,并结合我们的经验与体会,汇编成了生物技术大实验实验指导书,以供参考。在使用过程中,可根据不同的层次适当增减。同时,对于新近产生和应用前景广阔的生物芯片技术、RNAi技术和蛋白质组研究等,限于我们目前的条件,只能作些演示或作为动态给以介绍,条件一经成熟,即行开设。由于分子生物学技术和生物技术的快速发展,加之我们是第一次这样系统地给学生开设生物技术大试验课程,许多工作还处于不断探索的过程中,难免有不妥和疏漏之处,恳切期望读者提出宝贵意见,以利不断修正完善。目录注意:值日生的任务是协助实验准备及实验室卫生清扫,具体工作时间和任务由负责研究生安排(平时可能要做一些实验准备,如预实验、配液等。要求必须提前30分钟到实验室),老师监督并作为平时成绩考核。时间安排,每次课6-8学时,周三8:50-15:50;周四8:50-13:50,周六8:50-16:50;周日8:50-16:50;有些实验时间可能增加,视实验任务而定。无特别安排暂定周六1班和周日2班,有变动商议后提前告知。实验1、从动物组织中提取基因组DNA(刘小龙,徐鹏如)【值日生:06-1班蔡晗、陈作深、陈顺艳、邓大标;06-2班戴殷、邓科源、邓修康、高甘梅】实验2、PCR扩增基因特异片段(刘小龙,徐鹏如)【值日生:06-1班蔡晗、陈作深、陈顺艳、邓大标;06-2班戴殷、邓科源、邓修康、高甘梅】实验3、DN***段的回收及纯化(何伟璇,熊接华)【06-1班冯剑平、甘燕贞、霍嘉玲、李鉴清;06-2班邓勇、黄晓灵、贾小艳、李慧莹】实验4、PCR产物的TA克隆(何伟璇,熊接华)【06-1班冯剑平、甘燕贞、霍嘉玲、李鉴清;06-2班邓勇、黄晓灵、贾小艳、李慧莹】实验5、感受态大肠杆菌细胞的制备(CaCL2法)与质粒转化(王瑞晓,汪元梅)【06-1班李宝红、李仕勇、林世亮、刘成模;06-2班胡博、李丽坤、李晓鹏、李雯榕】实验6、PCR法快速鉴定重组载体(菌落鉴定)(王瑞晓,汪元梅)【06-1班李宝红、李仕勇、林世亮、刘成模;06-2班胡博、李丽坤、李晓鹏、李雯榕】实验7、质粒的提取和纯化(蔡伟光,肖敏)【06-1班刘青、罗龙清、罗月明、王光真;06-2班李炫、梁惠娟、梁礼健、梁勇】实验8、质粒DNA的电泳和纯度检测(蔡伟光,肖敏)【06-1班刘青、罗龙清、罗月明、王光真;06-2班李炫、梁惠娟、梁礼健、梁勇】实验9、限制性内切酶酶切法鉴定重组质粒.(杨林,柒启恩)【06-1班田朝阳、邬黎、王斌、王娟娟;06-2班林鑫城、饶靖、司徒昭韵、孙文俊】实验10、外源基因表达载体的克隆(杨林,柒启恩)【06-1班田朝阳、邬黎、王斌、王娟娟;06-2班林鑫城、饶靖、司徒昭韵、孙文俊】实验11、外源基因在大肠杆菌中的表达(赵增阳,程晓)【06-1班徐国华、徐小珊、姚光宇、余凌冰;06-2班涂子璐、徐建、许佳俊、杨志强】实验12、目标蛋白的PAGE检测(赵增阳,程晓)【06-1班徐国华、徐小珊、姚光宇、余凌冰;06-2班涂子璐、徐建、许佳俊、杨志强】实验13、RNA的提取及其纯度检测(李虹仪,程晓)【06-1班曾国章、曾秋丽、曾龙、张雨微;06-2班曾李、詹桂琴、周太刚、邹韵】实验14、逆转录PCR(RT-PCR)扩增基因特异片段(限选)(李虹仪,程晓)【06-1班曾国章、曾秋丽、曾龙、张雨微;06