文档介绍：中山大学
硕士学位论文
红毛五加抗炎有效成分的筛选及其抗炎机制的初步研究
姓名:欧阳资章
申请学位级别:硕士
专业:药理学
指导教师:龙启才
20060501
其抗炎机制的初步研究红毛五加抗炎有效成分的筛选及中文摘要其中多糖、苷类为其主要成分,苷类主要为刺五加苷类,尤以刺五加苷为多。心肌能量代谢、抗心律失常、解热镇痛、镇静催眠、抗肿瘤、增强免疫力、保肝、的研究比较少,而且停留在动物水平,对其抗炎的分子机制以及抗炎的成分研究硕士生:欧阳资章指导教师:龙启才教授中山大学药学院临床药理研究所阒红毛五加是五加科植物,主要分布于我国四川、甘肃、青海、宁夏等地,为传统的祛风除湿中药,以茎皮入药。性温、味辛、入肝肾经,具有祛风除湿、通关节、强筋骨之功效,主治风寒湿痹、足膝无力等症。红毛五加含有多糖、苛类、挥发油、鞣质、维生素⑽谺等成分。既往的研究证实红毛五加茎皮各种不同提取物分别具有增加冠脉流量、改善抗病毒、抗炎等多种药理作用,而且毒性较小。以前的研究多集中在红毛五加多糖抗肿瘤等研究上,对多糖的抗肿瘤机制研究比较深入。然而,对红毛五加抗炎很少。本课题组以前的研究已证实红毛五加的醇提物对小鼠腹腔巨噬细胞产生的有抑制作用。本研究在此基础上,应用细胞所产生的含量为筛选指标,对红毛五加抗炎有效成分进行了萃取、分离,得到了两个有效部分。并且初步探讨纯氯仿洗脱部分的抗炎作用机制。纯氯仿沈脱部分能够直接抑制的酶活性,而且纯氯仿洗脱部位还可以抑制致炎介质约癗牟遣挥跋旖橹蔿牟M保颐腔固教至舜柯确洗脱部分对肿瘤细胞的作用。本实验分为三部分中山大学硕士研究生论文:红毛五加抗炎有效成分的筛选及其抗炎机制的初步研究
第一部分:红毛五加茎皮抗炎有效成分筛选的含量,以能够抑制碳产生的作用为抗炎指标,逐步对目的:从红毛五加茎皮中提取、分离、筛选抗炎有效成分。方法:烀寮泳テし鬯椋ヒ掖冀,滤取提取液,重复上述操作一次,合并提取液,减压低温回收溶剂,加水溶解,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,合并正丁醇萃取部分,减压低温回收溶剂,真空低温干燥。正丁醇萃取部分干燥物用甲醇溶解,湿法加入硅胶柱,依次用溶剂系统氯仿一甲醇状、ァァァァァ%赐眩跹沟臀禄厥杖芗粒婵盏臀赂燥。訪刺激小鼠巨噬细胞样细胞.⒓醇尤牒烀寮痈鬏腿〔分、水相部分以及各分离部分共孵育梅派涿庖叻ú舛ㄏ赴锨逡褐蠵红毛五加提取物进行筛选。结果:玫桨咨⒋鼗粕ǖ拇柯确孪赐巡糠.,棕褐色的%甲醇洗脱部分兔演腿〔糠衷疞剂量下不抑制细胞活性,而乙酸乙酯萃取部分、正丁醇萃取部分以及水相部分在疞下不抑制细胞活性。分离部分中纯氯仿洗脱部分,%甲醇洗脱部分在/亮肯虏灰种葡赴钚裕渌赐巡分在疞下不抑制细胞活性。甊细胞在疞は虏鶳../,正丁醇萃取部分的/约疞剂量对碳细胞产生为縊.、縊./,与碳ぷ橄啾龋型臣蒲б庖,%。萃取水相/〔./,:红毛五加抗炎有效成分的筛选及其抗炎机制的初步研究
第二部分:红毛五加抗炎作用机制的初步研究氯仿洗脱部分/镻,/,/镻./,与碳啾龋型臣蒲б庖,抑制率分别为.%、.ァゼ状枷赐巡糠疞组为.±,:红毛五加抗炎的有效成分存在于其经乙醇提取,正丁醇萃取后的纯氯仿洗脱部分以及%甲醇洗脱部分。目的:初步研究从红毛五加中筛选出的纯氯仿洗脱部分的抗炎机制。方法:嘌鳵细胞,加入阿司匹林作用,抑制的表达,吸弃上清,加入新培养基,加入鳸激的表达慌嘌尤牒烀加纯氯仿洗脱部分,孵育蠹尤牖ㄉ南┧幔后立即吸取上清液,用放免法测定,以判断纯氯仿洗脱部分是否可以直接抑制的活性。,酶联免疫方法测定细胞上清液中煌虸暮恳约跋跛峄乖阜ú舛∟暮俊结果:./,与碳ぷ橄啾龋型臣蒲б庖。纯氯仿洗脱部分/亮孔椴腜/,%、../,┪./,与碳ぷ橄啾龋型臣蒲б庖。红毛五加纯氯仿洗脱部中山大学硕士研究生论文:红毛五加抗炎有效成分的筛选及其抗炎机制的初步研究/,
第三部分:红毛五加纯氯仿洗脱部分对肿瘤细胞的促凋亡作用分/亮孔椴腡—./,/亮孔椴腡—为:/,与碳ぷ橄啾龋型臣蒲б庖,%。/,与碳ぷ橄啾龋型臣蒲б庖。纯氯仿洗脱部分/亮孔椤疞剂量组、产生的一分别为/、/,与刺激组相比,无统计学意义甊细胞在碳は虏腘土,阳性药物