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多环芳烃、多氯联苯优良降解菌的分离鉴定及降解特性研究.doc

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多环芳烃、多氯联苯优良降解菌的分离鉴定及降解特性研究.doc

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多环芳烃、多氯联苯优良降解菌的分离鉴定及降解特性研究.doc

文档介绍

文档介绍:环境工程专业优秀论文多环芳烃、多***联苯优良降解菌的分离鉴定及降解特性研究关键词:多环芳烃多***联苯微生物降解降解菌分离鉴定摘要:作为持久性有机污染物(anicpollutants,POPs)的典型代表,多环芳烃(polycyclicaromatichydrocarbons,PAHs)和多***联苯(polychlorinatedbiphenyls,PCBs)的分析方法、环境影响及其污染修复技术是目前国内外热点研究领域,生物降解特别是微生物降解被认为是去除环境中PAHs、PCBs的主要途径。本文在全面综述国内外相关研究的基础上,通过调查和监测选择并确定了PAHs、PCBs污染的土壤样品,筛选得到的一株可以高效降解PAHs、PCBs的菌株,基于形态学特征、生理生化试验、细胞化学成分鉴定及16SrDNA序列比对分析等手段,鉴定该菌株属于两面神菌属(Janibactersp.),命名为JY11。以此为基础,系统研究了JY11对PAHs、,并借助气相色谱--质谱联用技术对降解中间产物的定性分析,初步探讨了该菌株对菲、芘、苯并(α)芘和PCB18、PCB77的代谢途径。论文主要研究内容和结果如下:(1)采用索氏提取、超声提取及超临界CO2提取三种样品前处理技术,结合GC-FID分析技术,研究获得了济南炼油厂及胜利油田土壤中PAHs的污染特征。济南炼油厂土壤中检出全部16种PAHs,~;胜利油田采油厂土壤中检出12种PAHs,~,两处土壤均在一定程度上受到了PAHs的污染。三种提取技术均有很好的提取效率和重现性,相对标准偏差(RSD%)小于5%(n=3),%~%,符合美国EPA标准中环境样品回收率(70%-140%)及RSD%(<20%)的要求。(2)采用液液萃取、超声萃取及固相萃取等三种样品前处理技术,结合本实验室前期建立的PCBs分析方法,研究建立了简便快速的PCBs提取及GC-ECD分析技术。研究测定了废弃国产变压器油中类二噁英类及阻转类PCBs的成分与含量,检出10种类二噁英类PCBs(PCB77,81,105,114,118,123,126,156,167,189)和4种阻转类PCBs(PCB45,95,132,149)。实验还结合Arcolor1242标准品对变压器油中PCBs组分进行了分析,得到PCBs的分布特征:二***%;三***%;四***%;五***和六***%。由此可见,国产变压器油以三***联苯为主,高***代PCBs所占比例很少。三种提取方法的RSD%均小于5%(n=3),%~%,符合美国EPA标准中回收率及相对标准偏差的要求。、PCBs降解菌的分离与鉴定(1)PAHs、PCBs优势降解菌的分离。采集济南市炼油厂、胜利油田采油厂及原济南市变压器厂的土样,以菲、蒽、芘的混合样品为唯一碳源,采用定时定量转接、逐步提高碳源浓度的方法,共获得125个单菌落,经降解效率初步测定,选取降解能力较强的两株细菌JY11和JY3A进行鉴定研究。(2)JY11和JY3A的鉴定。通过形态特征描述,综合运用生理生化检测、脂肪酸分析、***萘醌分型及GC摩尔百分含量测定等方法,结合16SrDNA序列分析、构建系统进化树,,由于Bacillus菌属目前定名的复杂性和不确定性,尚需进一步PFGE和DNA-DNA杂交实验数据支持鉴定到种。(3)JY11被鉴定为Janibacter菌属。该属1997年方予以命名,确定模式种为Janibacterlimosus,至今仅有5个种的报道。但JY11与该属模式种有较大差异,与其遗传距离最近的为Janibacteranophelis。细胞脂肪酸组成及含量分析结果表明,JY11在脂肪酸化学分类特征上表现出独特的菌株特异性,不同于Janibacterlimosus和Janibacteranophelis的已有报道。初步实验表明JY11在表现出良好的PAHs降解能力的同时,对PCBs亦有较好的降解能力,因此选择JY11菌作为后续研究的出发菌株。、PCBs的降解效果及影响因素研究(1),