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上传人:小雄 2019/12/31 文件大小:100 KB

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文档介绍

文档介绍:珊瑚海绵共生放线菌的分离分类及初步鉴定L1F;摘要:关键词由于海洋放线菌能够产生结构新颖、功能多样的次生代谢产物,成为新药来源的重要生物资源。生活在海洋生命极端环境中的海洋放线菌由于其独特的代谢途径以及产生新抗生素的能力,这不仅有助于其在极端环境中生存下来,也为我们提供了大量新颖的天然来源抗生素。因此,海洋环境将成为放线菌次生代谢产物的重要来源。20世纪30年代,ZoBell等发现海水具有杀菌的作用。随后,各国对海洋微生物资源的开发力度逐渐加大,但对其中生物资源的研究开发仍处于初级阶段。海洋放线菌广泛分布于海洋各种环境当中,海洋环境的的特殊性决定了海洋放线菌独特的代谢方式和代谢产物。近年来研究人员不断从各种海洋环境中发掘能够产生具有新型作用机制的抗生素和抑制剂的放线菌。,珊瑚样品,:腐植酸lg,,,MgSO4-,,复合维生素(,,,,,,,对■),豳水500ml,陈海水500ml,琼脂20g,:可溶性淀粉10g,,KNO32g,NaCI2g,K2HPO42g,MgSO4-,,FeSO4-,蒸憎水500ml,陈海水500ml,琼脂20g,-:甘油6ml,精氨酸lg,K2HPO4-3H2Olg,MgSO4-,NaCI20g,蒸馆水IL,琼脂20g,PH自然Raffinose-histidinemedium:raffinoselOg,L-histidinelg,MgSC)4・,,K2HPO4lg,蒸镰水500ml,陈海水500ml,琼脂20g,-:放线菌酮50mg/L,制霉菌索50mg/L,重辂酸钾50mg/L,蔡I定酮酸20mg/L,:酵母浸粉4g,麦芽浸粉10g,葡萄糖4g,蒸馆水500ml,陈海水500ml,琼脂20g,,清洗两次,将样品转移至无菌研钵,加少量的无菌海水(10ml)研磨成浆液,再将浆液转入离心管,取lml浆液稀释到10倍,100倍,,27°C培养14周,挑取明显分开的放线菌单菌落,在ISP2平板上划线纯化后,挑取单菌落T20%的甘油中・20°C保藏。根据菌落形态,显微镜下菌丝及砲子特征进彳丁初步鉴定。。接种分离出的菌株至燕麦培养基上,将灭菌的盖玻片斜插入平板,28°C下培养,分别于7,14,21d观察记录培养基内菌丝,气生菌丝和可溶性色素的颜色变化,并将盖玻片取出,在光学显微镜下观察基内菌丝,气生菌丝的形态,用电子显微镜观察砲子丝及抱子的特征。,用Chelex-100提取已