文档介绍：北方药学年第卷第期
丹参水煎液对分化为神经元样细胞的诱导作用研究△
胡向阳马义中山大学附属第五医院珠海;.暨南大学生命科学院广州
摘要:目的:研究丹参水煎液诱导分化为神经元样细胞的作用,探索提高向神经元样细胞分化的诱导条件。方法:
全骨髓贴壁法分离大鼠,倒置显微镜观察诱导后细胞形态学特征,流式细胞仪进行表面抗原鉴定,对诱导后的细
胞进行、、免疫细胞化学染色鉴定。结果:培养的细胞经流式细胞仪检测,符合表面标志特征。各对照组
诱导后阳性细胞率均高于空白组,.,其中丹参组阳性细胞率高于一巯基乙醇组,.,丹参组阳性细胞率
高于一巯基乙醇组,.;各诱导组表达为阴性。结论:丹参水煎液可以诱导向神经元样细胞分化。
关键词:骨髓间充质干细胞细胞分化丹参
中图分类号: 文献标识码: 文章编号:——
近年来,,药液室温放凉后,.过
人们的关注。骨髓间充质干细胞—~滤除菌,分装,保存。
,可分化为骨细胞、神经元细胞、
经胶质细胞、肝细胞等,诱导分化形成神经元样细胞, 将待诱导分化的分别移至放有无菌盖玻片的孔
为进一步施行干细胞移植、种子细胞培育、基因传染治疗神经板中,制备细胞玻片,待细胞融合至~%时,去除
系统疾病等提供了可能的物质来源『。目前,国内外研究主要完全培养液,—液清洗次,加入含/一巯基乙
以化学制剂,如二甲基亚矾、一巯基乙醇等作为诱导剂,诱导醇的%/培养基预诱导,培养后,去除预诱导
后的神经元样细胞体外存活时间短,且有一定细胞毒性,因液, .冲洗三次。空白组加入%胎牛血清—
此,寻找高效、无毒的诱导剂显得十分必要。中药有着基源广、培养液,一巯基乙醇诱导组加入./无血清,
药理作用多靶向等优势,其对干细胞诱导分化研究越来越受培养液,丹参水煎液诱导组加入/%胎牛血清
到重视,本实验探讨丹参水煎液诱导体外培养的大鼠—培养液。
向神经元样细胞分化的作用。.神经元样细胞形态观察
实验材料倒置显微镜观察神经元样细胞贴壁情况、形态变化、培养
.实验动物液性状改变、生长速度、折光度等形态学特征等。
大鼠,清洁级,月龄,雌性,体重,
东省实验动物中心提供合格证号:粤监证字,室每组各有个复孔,培养板置于,%培养箱中培
温,适应性饲养周后用于本实验。养,后,分别作、、免疫细胞化学染色,参
.实验药物及仪器照相应的试剂盒说明进行操作,计算表达阳性的细胞占所计
~巯基乙醇购于公司,丹参饮片购自广东省中医数细胞总数的百分比。比较各组最佳诱导分化浓度诱导后神
院,低糖—,,优级胎牛血清,兔经元样细胞、、表达阳性率。
抗鼠多克隆抗体、兔抗鼠多克隆抗体、
多克隆抗体、即用型试剂盒武汉博士德公司, ,定量指标以
显色试剂盒。型:培养箱±表示,组间比较采用方差分析及两两比较方差不齐采用
。型倒置相差显微镜,—秩和检验,检验水平.。
型流式细胞仪。实验结果
、细胞鉴定
.的分离、培养、鉴定原代细胞培养后,出现细胞贴壁现象,形态由圆盘状
采用全骨髓贴壁培养法,大鼠乙醚处死后,投人盛有% 逐渐向外伸出突起而转变短梭形。第大量贴