文档介绍:PCR扩增基因一原理聚合酶链反应—PCR是一种体外基因扩增技术,是在引物和四种脱氧核苷三磷酸存在下,利用DNA聚合酶反复作用,使微量的特定片段得以大量扩增的反应过程。PCR所需的条件:模板引物:决定扩增产物的特异性dNTPsTaq聚合酶Mg2+PCR反应过程:每三步为一个循环,每循环一次,使模板DNA拷贝数增加1倍,理论上讲,30个循环后,扩增产物为230拷贝二试剂及器材1、试剂(1)10×reactionbuffer:500mmol/LKCl,100mmol/LTris-HCl(),%明胶等。(2)MgCl2溶液:25mmol/L(3)dNTPs:,,,。(4)Taq酶(5U/ul)(5)DNA模板(6)引物溶液(10umol/L):包括ForwandPrimer和ReversePrimer两种。(7)50×TAE缓冲液:称取Tris碱242g,,用蒸馏水加至1L。(8)1×TAE缓冲液():将50×TAE缓冲液用蒸馏水稀释50倍。用作电泳缓冲液及配制琼脂糖凝胶。(9)6×凝胶加样缓冲液(6×loadingbuffer):%溴酚蓝,40%甘油,ddH2O。2、器材PCR仪,琼脂糖凝胶电泳系统三操作1、:反应物           体积(ul)ddH2O            ×PCR缓冲液        dNTP                     1引物1                                1Taq酶           ,短暂离心之后将样品放入PCR仪。2、按下述程序进行扩增(1)94