文档介绍:中华肿瘤防治杂志年月第卷第期,,. .
《实验研究
干扰抑制基因对肺癌细胞
药物敏感性影响的研究
潘泓, 左传田, 李力, 茅乃权, 张纬, 唐步坚
广西医科大学附属肿瘤医院胸外科,广西南宁
, —,, , , —
,,,..
【摘要】目的:用干扰技术下调肺癌:
细胞系切除修复交叉互补基因—
的表达,以提高肺癌细胞对化学药物. :
的敏感性。方法:首先构建针对基.
因的真核表达载体;其次将载体转
染肺癌细胞,采用—和蛋白质.
印迹法技术证实转染细胞中基因沉
默效果良好;最后采用法检测构建真.
核表达载体转染细胞对顺铂药物毒副反应.:
的影响。结果:成功构建针对基因.
的真核表达载体;将其转染肺癌细—
胞,可以抑制细胞中基因表
达,转染细胞较亲本细胞基因表达. , ..
降低. , .; 干扰的.
细胞较亲本细胞对顺铂的敏感性升高了/.:—
.倍。结论: 干扰是一种沉默
表达的理想方法。沉默表达可.
以提高肺癌细胞的化疗敏感性,它可能是一.—
种有潜质的肺癌辅助治疗新方法。.
中华肿瘤防治杂志,,:—, , ,,:—
【关键词】肺肿瘤;细胞系,肿瘤;基因;,小分子干扰
;,;;,
切除修复交叉互补基因癌症关系是一个热点问题。干扰—
,是细胞内复制及损,是最近几年发现和发展起来的新兴的
伤修复环路中的一个关键基因,目前关于与基因阻断技术,与以往的基因阻断技术比较,更
具有快速、有效、容易操作和序列特异性强等优点。
本研究通过构建能转录产生大量短发卡结构
【基金项目】广西科学基金桂科青,的质粒载体
【通讯作者简介】潘泓,男,广西宜州人,博士,副主任医师,主
—,将其转染至肺癌细胞中,研究
要从事胸外科临床与基础的研究工作。
沉默基因表达是否能增强对化疗药物的敏感
:
—: 性,为探索一种有潜质的肺癌辅助治疗新方法奠定
..
基础。
. .
t6繇墨塑, 笠堡盟垒壬垫控制 E R 堕! 基因对肺癌细胞 A 5 4 9 药物敏感性影响的研究
1 材料与方法抑制率( % ) 一( 1 一菊鼋糕) X 1 0 0 %
1 . 6 统法
1 . 1 s iR N A 表达载体的构建计学方
数据处理采用 S P S S 1 3 . 0
根据 G e n B a n k 数据库提供的 E R C C I 基因核苷酸软件包在计算机上进
, 岳± s
T u s e 行数据以表示。计量资料以单因素方差分析
序列, 按照 h l 设计原则, 设计并化学合成 4 对双
n e — w a
( O A N O V A ) , P 0 .
R s y 进行统计学处理以< 0 5 为
链小干扰 N A ( i R N A ) , 瞬时转染 A 5 4 9 细胞, 通过
—差异有统计学意义。
半定量 R T P C R 检测各转染细胞 E R C C l 表达, 筛选
一 s
个有效的 i R N A 列。
序设计并合成能表达其小发 2 结果
卡结构 R N A ( s h R N A ) 的 D N A 序列, 并与 p