文档介绍:血凝与血凝抑制实验
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一、实验目的
1、掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操 作方法和结果判定方法
2、了解新城疫有关背景知识
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二、实验内容
1、血凝试验(HA)
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红细胞
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结果
-
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+
++
++ +
+ + +
+ +
+ +
+ +
+ +
+ +
+ +
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+ +
+ +
+ +
-
血凝抑制效价测定
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结果判定标准
1、++++:红细胞呈细沙样均匀铺于孔底,即100%凝集;
2、+++:红细胞均匀铺于孔底,当边缘不整齐而稍向孔底集中,即75%凝集;
3、 ++:红细胞形成一个环状,四周有下凝集块,即50%凝集;
4、 +:红细胞于孔底形成圆团,边缘不够光滑,四周稍有凝集块,即25%凝集;
5、-:红细胞于孔底形成圆团,边缘光滑整齐,即无凝集。
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血凝抑制价的判定
以出现完全抑制凝集(即不凝集) 的血清最高稀释倍数为该血清的血凝抑制价(1:4)。
稀释倍数
2 ×
4 ×
8×
16 ×
32 ×
64×
128 ×
256
×
512
×
1024
×
2048
×
血清对照
结果
—
—
+
++
++
+
+ +
+
++
++
++ ++
++ ++
++ ++
++ ++
—
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六、注意事项
1、红细胞用前请摇匀
2、用枪加样定要准,尽量不要有气泡
3、结果判定有耐心
4、HA和HI勿相混
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七、新城疫背景介绍
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鸡新城疫(Newcastle Disease ND )
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1、概 述
ND是由ND病毒(Newcastle disease Virus, NDV)引起的高度接触性和高度毁灭性的急性败血性传染病。
1926年首先发生于印尼,同年发现于英载
是当今全球范围内最严重的家禽传染病之一
被国际兽疫局(OIE) 列为A类传染病
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别名:
新城疫、亚洲鸡温、伪鸡瘟
鸡瘟 :
禽流感、欧洲鸡温、真性鸡温
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新城疫病毒,属副粘病毒科,副粘病毒属。
病毒颗粒表面具有血凝素蛋白,可以刺激机体产生血凝抑制抗体,
2、病原体
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根据临诊表现和病程长短分为:
(1)最急性型:
突然发病,病变不明显,见于雏鸡及本病流行初期。
急性型:(典型新城疫)
亚急性型(非典型ND)
慢性型(非典型ND)
3、病状及病理变化
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(2)、急性型:侵害消化系统为主,也称嗜内脏速发型。
病状特点:
a. 食欲减退,饮水增加,离群呆立,眼睛半开半闭,翅膀下垂,冠、肉髯呈紫黑色。
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b. 嗉囊积液 、体温升高、呼吸困难。鼻腔内有大量分泌物,严重拉稀 粪便呈黄绿色或褐色,有时混有血。
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, 非免疫鸡感染后可以80-100%死亡。
,头颈歪向一侧而咀向上,母鸡产蛋下降。
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病变特点:
全身的粘膜和浆膜出血,突出病变在消化道。
,粘膜上的乳头及其周围有出血点,间有溃疡。
、腺胃与食道交界处粘膜可见到出血点或出血带。
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、直肠、泄殖腔粘膜充血、出血或有坏死,
。
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第三十页,共40页。
皮下脂肪出血
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脑膜充血出血
卵黄性腹膜炎
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有的病鸡表现眼结膜炎
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(3)、亚急性型(非典型ND,以侵害呼吸道为主)也称肺脑炎型:
其主要的特点:是症状及病变不典型。
症状:多见4-35日龄鸡,25日龄前后最常发病。
呼吸困难,精神沉郁,
继而较早地出现神经症状,此时出现歪头,扭颈,角弓反张,倒地不能起立。
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病变:喉头及气管粘膜水肿,出血、充血、并有大量粘液,
肺呈紫黑