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一种检测一次性使用卫生用品致病菌的多重PCR方法.pdf

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一种检测一次性使用卫生用品致病菌的多重PCR方法.pdf

文档介绍

文档介绍:万方数据
一种检测一次性使用卫生用品致病菌的多重椒赵琢,栗建永,李贾晓川,赵黎华牧嫌敕椒工业微生物一:翌笙星塑:丝晶,张园,摘要:建立了一种多重椒ǎ梢钥焖偌觳庖淮涡允褂梦郎闷分械穆膛Ц艘稹⒔鸹粕萄球菌及大肠杆菌。通过单重及多重种致病菌的目的基因进行特异性扩增,其中单重检。该方法具有良好的检测特异性,实现了一次性使用卫生用品中致病菌的快速检测。关键词:灰淮涡允褂梦郎闷罚宦膛Ц司唤鸹粕咸亚蛞穑淮蟪Ω司一次性使用卫生用品,是与使用者皮肤直接接触产品,如用于老人、婴儿、病人的护理或妇女经期,其卫生安全性尤其重要。我国现行的国家强制标准涡允褂梦郎闷肺郎曜肌饭定,一次性使用卫生用品中,致病菌不得检出,包括绿脓杆菌鸹粕咸亚菌痛蟪Ω司D壳岸哉庑┎≡妇募觳庵饕2捎么诚菌学培养法¨话阈,存在着操作繁琐、灵敏度低、出现假阴性等缺点,且每次实验通常只能检测一种病原细菌。多重际跏窃谕环从μ逑抵型奔尤多对引物扩增多条目的危迪侄嘀植≡生物的同时检测,为病原微生物的鉴定提供了快速、灵敏、经济的方法∞1臼笛椴握瘴南字新膛Ц司的颉⒔鸹粕咸亚蚓膌基因和大肠杆菌的基因,建立了一种高灵敏度和特异性的单重及多重体系检测一次性使用卫生用品中的致病菌,为其在一次性使用卫生用品中微生物指标的检测方法的发展奠定了基础。.鹬实验所用菌株共辏直鹗锹膛Ц司轪,购自中国工业微生物菌种保藏管理中心;金黄色葡萄球菌来自天津出人境检验检疫局;。.∈约梁离心柱型×┭甘狄涤邢薰疽搅设备厂⒘⑹窖沽φ羝鹁上海博迅实业有限公司医疗设备厂┎∠洹⒆贤夥治鲆北京市六一仪器厂蚉扩增仪拦鶤疃轶堕生坠垫翌垒墅痡..—...。物第卷第旖虺鋈刖臣煅榧煲呔止ひ挡钒踩ḿ际踔行模旖一—、。一基金项目:国家质检总局科技计划项目作者简介:赵琢,男,理学博士,高级工程师。,,簔甮.。
万方数据
中吸取菇又值揭禾錖校勇膛Ц司脑取筆产物,以赵琢等:一种检测一次性使用卫生用品致病茵的多重椒公司⒘亢怂岬鞍撞舛ㄒ拦鶴公司。鹬只罨袄┰分别从金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的原始菌液始菌液中吸取又值紺Q庵体培养基中,在摇床K痬培养罨次后备用。对活化后的菌液用无菌生理盐水进行梯度稀释,均匀涂布于对应的固体培养基上,在培养箱经过。嘌进行计数,然后挑取单菌落接种到对应的液体培养基中,在摇床K痳经过。,溶菌酶进行酶解后,用细菌基因组崛∈约梁刑崛∈笛榫O妇鶧的提取方法按细菌基因组取试剂盒中说明书的操作流程进行。金黄色葡萄球菌根据基因序列、大肠杆菌根据基因序列㈨,绿脓杆菌根据蛐列㈨,参照文献设计引物,引物由苏州金唯智生物科技有限公司合成表嘀豍引物序列实验中先对三种菌株进行单独┰觯缓随机选取菌株进行多重┰觥反应体系稬菁。最后对┰霾锝械表从μ逑飨喽苑肿又量指示,用%。.匾煨匝橹用昴勘昃幕蜃镈分别进行应,验证该方法检测绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的特异性。在验证多重检测特异性时,将绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌基因组取液随机组合,以进一步验证该方法的特

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