文档介绍：中国组织工程研究与临床康复眷第铲——出版
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标记兔心肌肌钙蛋白的荧光特性
叶秉坤,冷水龙,李佳楣

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摘要
背景:心肌肌钙蛋自在检测心肌梗死的诊断中有极其重要的床意义。
目的:将荧光标记物应用于心肌肌钙蛋白,观察其是否可用作与收缩调节蛋白之间相互作
用的研究。
设计、时间及地点:随机对照实验,于—/—在广州医学院人体解剖教研室完成。
材料:成年兔,由广州医学院实验动物中心提供。
方法:利用反转录一聚合酶链反应技术制备兔心肌肌钙蛋白的基因片段,应用基因重组技术将兔心肌肌钙蛋白基因片段克
隆到表达载体,根据定点诱变的方法,取得突变型的兔,分别将一和一’.
一标记在兔肌钙蛋白,并进行恒态荧光测定和时间一分辨荧光测定。
主要观察指标:兔,及一的荧光特性。
结果:一标记的兔肌钙蛋白在波长处进行激发,其发射峰值出现在波长处,加入饱和的镁离子可导致荧
光强度减少%,继续用饱和的钙离子滴定,其荧光强度再减少%,而且波峰向蓝光方向移动。标记的
在加进镁离子和钙离子后引起的荧光反射的跃迁,并不出现在用一标记的上。然而,不管使用哪一种荧光标记物,
钙引起的构象变化这个作用并没有改变。钙滴定实验表明,两种荧光标记物标记的荧光发射结合参数是一致的。
结论:标记可以应用于心肌肌钙蛋白与其他收缩调节蛋白之间相互作用的研究。广州医学院人体
关键词:;; 繁萧室广

叶秉坤,冷水龙,,,:—
叶秉坤,男,
【:.. ://..】年生,广东省广州
市人,汉族,
年广州医学院毕
业,讲师,主要从
钙蛋白、肌钙蛋白和原肌球蛋白传送到肌动蛋事肌蛋白的研究。
引言白,这种信号传导的最终反应就是肌动球蛋白.
酶的激活和肌纤维产生收缩力。中图分类号:
文献标识码:
脊椎动物横纹肌的收缩是由细肌丝上的关于结构和功能的了解大部分是从生理文章编号:—
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肌钙蛋白结合钙离子后而引起的【。肌钙蛋白值的蛋白质溶液中获得的【孓】。用荧光恒态和时
收稿日期:——
是肌钙蛋白中唯一的钙结合受体,它与钙结间分辨及生物工程的方法,实验观察了有内在和修回日期:——
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合可导致很大的构象变化,这些变化可通过肌外在标记物的的动态结构。较早前课题小组的’
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