文档介绍：丹参多糖的分离纯化及免疫活性研究课题来源:广东省科技计划项目学位申请人导师莫志贤蔡红兵刘法锦游文玮研究员月广州市白云区科技计划项目甋专名称指教答辩委员会主席答辩委员会成员中药学汤伟教授副研究员于荣敏张继平马骥论文评阅人孙学刚广州南方医科大学级硕士学位论文业
丹参多糖的分离纯化及免疫活性研究硕士研究生:汤伟指导老师:莫志贤教授蔡红兵副研究员摘要研究背景多糖是中药中一类天然高分子化合物,是维持生命正常运转的基本物质,有调节免疫系统功能、抗氧化以及抗衰老等作用,具有巨大开发潜力。近年来,多糖的研究引起了国内外许多学者极大的兴趣。多糖不但能治疗机体的免疫系统受到严重损伤的肿瘤,而且能治疗多种免疫缺损疾病,其免疫疗法已经给近代肿瘤、艾滋病及其它疾病的治疗开辟了新的方向。此外,由于分子生物学和分析新技术的高速发展,活性多糖的分离和分析手段也取得了很大的进展。丹参谴叫慰剖笪膊菔糁参铮愿案ト胍我国传统中药材,可用于治疗冠心病、中风、微循环障碍等疾病。丹参最早记载见于《神农本草经》,性味苦、微温,有活血祛瘀,安神宁心,排脓,止痛的功效,被列为上品。现代研究表明,丹参是著名的活血化瘀良药,临床广泛用于治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞和脑血管疾病,疗效确切。丹参中脂溶性有效成分为丹参酮类,具有抗菌作用;水溶性有效成分为酚酸类,具有抗氧化、改善心肌缺血等药理作用。目前对于丹参活性成分的研究仅限于以上两类小分子物质,而对于极具开发前景的活性多糖及糖蛋白类物质的研究报道较少。研究目的丹参多糖是近年来才开始研究的丹参有效部位之一。课题组前期对丹参多糖的提取工艺进行了研究和优化,现已能够提取含量高、活性强的丹参多糖,对其药理作用的进一步研究表明丹参多糖具有显著的抗免疫性肝损伤的作用,硕士学位论文
捎么罂资髦ḿ袄胱咏换徊阄鲋ň拼炕侄嗵牵酆媳冉螪、而且在一定浓度范围内存在剂量依赖性。在上述研究的基础上,拟将丹参多糖作为一个免疫增强剂来开发,深入研究其精制工艺,完成部分临床前研究。同时为了进一步开发利用丹参资源,本课题选取丹参为材料,采用现代分离分析技术对丹参多糖组分进行了分离、纯化,并采用现代功能评价方法对小鼠的免疫调节活性进行了初步研究。实验方法及结果げ我┎木岽汲痢⒄婵崭稍锛吹盟苄源侄嗵2捎帽椒硫酸法测定丹参总多糖的含量,考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量。结果显示,葡萄糖在7段谙咝怨叵盗己茫毓榉匠涛獃..;蛋白浓度在玂..涫保胛舛瘸柿己玫南咝怨叵担回归方程为】,..。结果表明,本方法精密度高、重现性好,可用于丹参总多糖与蛋白质的含量测定。检测发现粗丹参多糖中,多糖含量为.%、蛋白质含量为ァ捎肧法、三氯乙酸法对丹参多糖进行除蛋白处理,通过比较不同方法处理后的蛋白含量及多糖含量来确定最佳的除蛋白工艺条件。正交实验优选ㄍ训鞍椎淖罴烟跫牵毫弦罕任猯:确掠攵〈嫉呐浔任:馗床僮鞔问次,此条件下蛋白质去除率为.%,.%,多糖保存率为.%。实验结果表明,,⑾諥、一偷氖髦训鞍仔Ч茫训白效率高,纯化后多糖含量分别可达.%、.%。总多糖经一树脂进一步分离纯化得到、、三个组分。结果表明,.摇于ā摘要
菇多糖月·粜宰椋珻丹参多糖高剂:璽·、げ味嗵げ味嗵嵌孕∈笤嗥飨凳挠跋欤孩儆胝W楸冉希珻P妥榈男小鼠免疫抑制模型成功。②与模型组比较,丹参粗多糖黾亮孔榈钠⒃嘞凳明丹参多糖各剂量组均可对抗引起的脾萎缩,使脾脏系数上调。③丹参多菇多糖可使免疫功能抑制小鼠的吞噬功能上调。③丹参多糖低剂量、。.籏∈笏婊治?瞻锥哉兆椤⒛P虲·。香中剂量组詋分虲丹参多糖低剂量组·组,在给药天后,进行碳粒廓清实验,并计算脏器指数、吞噬指数和吞噬系数,观察丹参多糖对诱导的免疫低下小鼠相关免疫脏器及网状内皮系统吞噬功能的从实验结果看出:腺系数、、。げ味嗵嵌孕∈,造模成功。②与模型组比较,阳性药组的稻灾系,┫⒅屑亮孔榭墒姑庖咭种菩∈蟮耐淌晒δ苌系鳌8呒量的吞噬系数⑼。üげ味嗵嵌悦庖咭种菩∈笱G逯蠭的影响研究,硕