文档介绍:玻片直接凝集试验【目的】【原理】颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下发生反应,出现肉眼可见的凝集小块,称为直接凝集反应。将已知的抗体直接与待检的颗粒性抗原物质(如细菌、立克次体、钩端螺旋体、红细胞等)混合,在有适当电解质存在的条件下,如两者对应便发生特异性结合而形成肉眼可见的凝集物,即为阳性;如两者不对应便无凝集物出现,即为阴性。该试验属定性试验,常用于细菌的分型鉴定和检查人类红细胞ABO【、大肠杆菌18~:40稀释的伤寒杆菌诊断血清;;、接种环、酒精灯、特种铅笔(记号笔)、吸管(带乳胶吸头)。,各用特种铅笔画为2等分,在玻片的左上角标明1、2。如图5-112生理盐水1:401:40生理盐水++++伤寒杆菌伤寒杆菌大肠杆菌大肠杆菌于上述两玻片的左端用灭菌的接种环各加生理盐水1~2环,同样右端各加1:40伤寒杆菌诊断血清1~2环。,冷却后取少许伤寒杆菌培养物,先置于第1号玻片左端与生理盐水混匀,再取同种细菌加至第1号玻片右端与伤寒杆菌诊断血清混匀,轻轻摇动玻片,1~2min后观察结果。。观察结果,并与1号玻片比较。【结果观察】如果上述混合悬液由均匀混浊变为澄清透明,并出现大小不等的乳白色凝集块者,即为凝集反应阳性(+),如果混合物仍呈均匀混浊状者,则为凝集反应阴性(-)。如肉眼观察不够清楚,可在低倍镜下观察。本次实验结果应为:第1号玻片右端出现大小不等的乳白色凝集物,即阳性;第1号玻片的左端和第2号玻片的左右端无凝集块,即阴性。【注意事项】,实验过程中务必严格无菌操作。接种环必须作灭菌处理。结果观察后,将玻片放入盛有消毒液的指定容器内,切忌任意存放或冲洗。,与诊断血清混合时,必须将细菌涂散,涂均匀,但不宜涂得太宽,以免很快干涸而影响结果的观察。?冰箱中,使用时应注意用无菌吸管或灭菌接种环,不能以瓶盖直接沾取于玻片上,以免污染和造成效价降低。诊断血清若超过有效期限则不宜再使用,以免造成错误诊断。,不可混有杂菌,以免影响结果。ABO【原理】人类ABO血型抗原有A和B两种,A型血红细胞膜上有A抗原,B型血红细胞膜上有B抗原,AB型血红细胞膜上有A和B两种抗原,而O型血红细胞膜上A和B两种抗原均无。据此,如分别将抗A和抗B血清与待测红细胞混合,抗A或/和抗B血清与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集,根据凝集情况便可判定出受试者的血型。【材料】(常于血清内加适当染料以示区别,A型为红色,B型为蓝色)、生理盐水。、特种铅笔(记号笔)、小试管、刺血针、75%酒精棉球、无菌干棉球、毛细吸管、牙签(或小玻棒)、光学显微镜。【方法】,用特种铅笔将其划分成两格,分别于其角上注明“A”、“